Цель: на основе сетевой фармакологии, молекулярного докинга и животных экспериментов исследовать механизм действия больших кровавых лоз в облегчении нейропатической боли (NP). Метод: применяли высокоэффективную жидкостную хроматографию - квадруполь - орбитрап высокоточной масс-спектрометрии (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS) для идентификации химических компонентов больших кровавых лоз. С помощью сетевой фармакологии предсказали ключевые мишени и связанные пути вмешательства больших кровавых лоз при NP. 48 крыс SD случайным образом разделили на группы фиктивной операции, модели, три группы с низкой, средней и высокой дозами больших кровавых лоз (1,35, 2,7, 5,4 г/кг), группу прегабалина (30 мг/кг). Создали модель хронической компрессионной травмы (CCI) для NP, измеряли порог механического (MWT) и теплового (TWL) сокращения лап до операции, на 3 и 5 дни после операции, а также на 3, 7, 11 и 14 дни после медикаментозного вмешательства. Иммунофлюоресценцией (IF) обнаруживали экспрессию маркера нейронной возбудимости препарата c-Fos и рецептора нейрокинина 1 (NK-1R), необходимого для центральной сенситизации. Западный блот (Western blot) использовали для определения экспрессии и уровня фосфорилирования в спинном мозге белков мозгового нейротрофического фактора (BDNF), рецептора тирозинкиназного типа B (TrkB), фосфолипазы Cγ (PLCγ), кальций/кальмодулин-зависимой протеинкиназы IIα (CaMKⅡα), белка, связывающего cAMP response element (CREB). IF также использовали для детекции фосфорилированных форм p-TrkB, p-PLCγ, p-CaMKⅡα, p-CREB. Результаты: большие кровавые лозы содержат 138 соединений, с помощью сетевой фармакологии выявлено 409 потенциальных мишеней вмешательства в NP, включая 74 ключевые мишени, такие как рецептор тирозинкиназы нейтрофина 2 (NTRK2), простагландинпероксидазный синтаз 2 (PTGS2), мишень рапамицина (mTOR), протеин киназа 1 (Akt1), митоген-активируемая протеин киназа 1 (MAPK1) и др. Молекулярный докинг показал хорошее связывание NTRK2 (ген, кодирующий TrkB) с родиолозидом, цинашином, генистеином, кверцетином, нарингином, куркумином. Поведенческие эксперименты показали, что по сравнению с фиктивной операцией у модели значительно снизились пороги MWT и TWL (P<0,01). IF показал значительное повышение экспрессии c-Fos и NK-1R в спинном мозге группы модели по сравнению с группой фиктивной операции (P<0,01); у группы высокой дозы больших кровавых лоз наблюдалось значительное снижение этих маркеров по сравнению с моделью (P<0,01). Western blot и IF выявили значительное повышение экспрессии BDNF, TrkB, p-TrkB, PLCγ, p-PLCγ, CaMKⅡα, p-CaMKⅡα, CREB, p-CREB в спинном мозге группы модели по сравнению с фиктивной операцией (P<0,01); при высокой дозе больших кровавых лоз эти белки значимо снижены (P<0,01). Заключение: большие кровавые лозы облегчают нейропатическую боль путем подавления нейронной возбудимости и центральной сенситизации через путь сигнализации BDNF/TrkB/CaMKⅡ/CREB.

большие кровавые лозы; нейропатическая боль; нейронная возбудимость; центральная сенситизация; мозговой нейротрофический фактор (BDNF)/ рецептор тирозинкиназы B (TrkB)/ кальций/кальмодулин-зависимая протеинкиназа IIα (CaMKⅡα)/ белок, связывающий элементы ответа cAMP (CREB)