Цель исследования — изучить влияние рецепта养精种玉汤 на сигнальный путь SIRT1/PGC-1α, участвующий в регуляции митохондриального биогенеза и оксидативного стресса у крыс с индуцированной циклофосфамидом овариальной недостаточностью (DOR), а также исследовать механизмы улучшения функции овариального резерва и развития фолликулов. Были выбраны 42 самки крыс SD восьминедельного возраста с нормальным циклом эструса, случайно разделённые на контрольную группу (7 животных) и модельную группу (35 животных). Модель индуцировали однократным внутрибрюшинным введением циклофосфамида в дозе 90 мг/кг, после чего наблюдали в течение 7 дней и оценивали успешность модели по нарушению цикла эструса. После успешного моделирования проводили вмешательства: группа получила эстрадиол валерат (0,09 мг/кг) и разные дозы养精种玉汤 (высокая, средняя, низкая — 19,98, 9,99, 5,00 г/кг), контрольная и модельная группы — эквивалентный объём дистиллированной воды. Все группы получали перорально по одному разу в день в течение 4 недель. В течение эксперимента фиксировали общее состояние, массу тела и массу яичников, рассчитывали индекс органов. С помощью ELISA определяли уровни ФСГ, ЛГ, эстрадиола (Е2), антимюллерова гормона (АМГ), а также активность супероксиддисмутазы (SOD) и глутатионпероксидазы (GSH-Px) в сыворотке, гистологически исследовали морфологию ткани яичников и развитие фолликулов с помощью окраски гематоксилин-эозином (HE), определяли уровень ROS с помощью иммуногистохимического флуоресцентного метода, измеряли содержание АТФ и МДА с помощью колориметрического анализа, количество копий митохондриальной ДНК (mtDNA) и экспрессию мРНК ключевых генов (SIRT1, PGC-1α, NRF1, TFAM) количественной ПЦР в реальном времени, а также уровни белков с помощью вестерн-блоттинга. По сравнению с контрольной группой у модельной наблюдались нарушения цикла, снижение массы тела и индекса яичников (P<0,05), истончение коркового слоя, рыхлая структура, значительное уменьшение числа первичных и растущих фолликулов (P<0,01), значительное повышение уровней ФСГ и ЛГ (P<0,01), снижение уровней Е2 и АМГ (P<0,05; P<0,01), значительное снижение содержания АТФ и числа копий mtDNA (P<0,01), повышение экспрессии ROS и МДА, снижение активности SOD и GSH-Px (P<0,05; P<0,01), снижение уровней мРНК и белков SIRT1, PGC-1α, NRF1 и TFAM (P<0,05; P<0,01). После лечения в группах, получавших养精种玉汤, отмечалось значительное восстановление массы тела и индекса яичников (P<0,05), повышение уровней Е2 и АМГ, снижение ФСГ и ЛГ в сыворотке (P<0,05; P<0,01), повышение содержания АТФ и копий mtDNA в яичниках, снижение уровней ROS и МДА, повышение активности антиоксидантных ферментов SOD и GSH-Px (P<0,05; P<0,01), значительное повышение экспрессии генов и белков сигнального пути SIRT1/PGC-1α/NRF1/TFAM (P<0,05; P<0,01). Окраска HE показала постепенное восстановление структуры яичников, увеличение числа первичных и растущих фолликулов (P<0,05; P<0,01), ровное расположение гранулезных клеток и улучшение функции яичников. Вывод:养精种玉汤 может улучшать функцию яичников при DOR за счёт активации сигнального пути SIRT1/PGC-1α, стимулируя митохондриальный биогенез, улучшая функции митохондрий и снижая повреждения, вызванные оксидативным стрессом.

养精种玉汤; овариальная недостаточность; сигнальный путь SIRT1/PGC-1α; оксидативный стресс; митохондрии