Настой Цинь Лян Хун Цю Тан улучшает неалкогольный стеатогепатит, способствуя поляризации макрофагов через сигнальные пути TLR4 и STAT6

ZHANG Yong ,  

HU Yong ,  

HE Yunliang ,  

YANG Yang ,  

CHEN Donghui ,  

DANG Sijie ,  

HE Jia ,  

LUO Yaqi ,  

摘要

Цель исследования — изучить эффективность и механизм действия настоя Цинь Лян Хун Цю Тан на неалкогольный стеатогепатит (NASH). Мыши C57BL6 J были случайным образом разделены на нормальную группу и модельную, которым кормили высокожировой диетой в течение 12 недель для моделирования заболевания. После успешного моделирования мышей модельной группы рандомизировано разделили на модельную группу, группы настоя Цинь Лян Хун Цю Тан с низкой, средней и высокой дозировкой (0.51, 1.02, 2.04 г/кг) и положительную группу, получающую метформин, по 6 особей в каждой, с лечением в течение 8 недель. Наблюдали изменения массы тела до и после лечения; биохимическими методами измеряли общий холестерин в сыворотке (TC), триглицериды (TG), холестерин липопротеинов низкой плотности (LDL-C) и содержание TC, TG и LDL-C в печени; гематоксилин-эозиновое (HE) и окрашивание маслом красным O использовали для наблюдения патологии печени и жирового отложения; с помощью проточной цитометрии, иммуноферментного анализа (ELISA) и количественной ПЦР в реальном времени определяли экспрессию макрофагов печени и маркеры; методом вестерн-блот и иммунной флуоресценции исследовали возможные механизмы поляризации макрофагов под воздействием настоя. По сравнению с нормальной группой у мышей модельной группы наблюдалось увеличение массы тела, значительное повышение уровней TC, TG и LDL-C в сыворотке и печени (P<0.01), патология печени показала неоднородные круглые липидные капли и воспалительную клеточную инфильтрацию; результаты проточной цитометрии показали значительное увеличение доли CD86-положительных клеток и значительное снижение доли CD206-положительных клеток (P<0.05); уровень iNOS и экспрессия TNF-α mRNA в печени значительно возросли, тогда как содержание IL-10 и уровень экспрессии IL-4 mRNA значительно снизились (P<0.01); белковая экспрессия TLR4, TRAF6 и MyD88 значительно увеличилась (P<0.01). По сравнению с модельной группой у мышей, получавших настой Цинь Лян Хун Цю Тан различных доз и метформин, масса тела снизилась, уровни TC, TG и LDL-C в сыворотке и печени значительно уменьшились (P<0.01), патология печени показала уменьшение жирового отложения и значительное снижение липидных капель и воспаления. Иммунная флуоресценция и проточная цитометрия показали значительное снижение доли CD86-положительных клеток и заметное увеличение доли CD206-положительных клеток (P<0.05); уровни iNOS и TNF-α mRNA в печени значительно снизились (P<0.01), содержание IL-10 и экспрессия IL-4 mRNA значительно повысились (P<0.01), белковая экспрессия TLR4, TRAF6 и MyD88 значительно снизилась, фосфорилирование STAT6 значительно повысилось (P<0.05, P<0.01), общий уровень STAT6 не изменился статистически значимо. Вывод: настой Цинь Лян Хун Цю Тан эффективно улучшает воспаление печени у мышей с NASH, вероятно, за счет активации сигнальных путей STAT6 и TLR4, приводящих к поляризации макрофагов с фенотипа M1 на M2.

关键词

Настой Цинь Лян Хун Цю Тан; неалкогольный стеатогепатит (NASH); поляризация макрофагов; Toll-подобный рецептор 4 (TLR4); сигнал-трансдукция и активация транскрипции 6 (STAT6)

阅读全文