Цель исследования — изучить, оказывает ли формула Бусен Тунло (补肾通络方) ингибирующее влияние на поляризацию макрофагов через регуляцию сигнального пути Wnt3a/β-катенин, что ведет к уменьшению эпителиально-мезенхимального перехода и избыточного отложения внеклеточного матрикса, с целью выяснения механизма действия формулы при лечении легочного фиброза и предоставления новой теоретической базы для клинической терапии. Методика: 50 самцов крыс линии SD случайным образом разделены на контрольную, модельную группы, группу лечения пиффенидоном и группы с высокой и низкой дозами Формулы Бусен Тунло. За исключением контрольной группы, в другие группы внутри трахеи вводился блеомицин для моделирования легочного фиброза. Интервенцию проводили на 28-й день после создания модели: группы с высокой и низкой дозами получали 30,88 и 15,44 г·кг-1 формулы Бусен Тунло через зонд, группа пиффенидазона — капсулы пиффенидона 110 мг·кг-1, контрольная и модельная группы — физиологический раствор в равном объеме, один раз в день в течение 90 дней. По окончании лечения уровни TGF-β1 в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (BALF) определяли методом ELISA; сравнивали морфологию легочной ткани и долю коллагена; иммуногистохимией определяли распределение и экспрессию белков E-кадгерин, цитокератин 19, α-SMA, виментин, коллаген I и III; иммунофлуоресценцией — белков CD68, Arg-1, iNOS, Wnt3a и β-катенина; методом вестерн-блот — экспрессию белков Wnt3a и β-катенина; Real-time PCR — экспрессию мРНК Wnt3a и β-катенина. Результаты: по сравнению с контрольной группой, в модельной отмечались обильная инфильтрация воспалительных клеток в стенках дыхательных путей, альвеолярных полостях, строме; выраженная фибропролферация; значительное повышение уровня TGF-β1 в BALF; снижение экспрессии E-кадгерина и цитокератина 19; увеличение α-SMA, виментин, Wnt3a, β-катенин, коллагена I и III; повышенный флуоресцентный позитивный участок CD68, Arg-1, iNOS, Wnt3a и β-катенина; значительное увеличение белковой и мРНК экспрессии Wnt3a и β-катенина (P<0,01). По сравнению с модельной группой все группы лечения в разной степени уменьшали воспалительный инфильтрат и фибропролферацию в тканях дыхательных путей и альвеол; снижали уровень TGF-β1 в BALF; повышали экспрессию E-кадгерина и цитокератина 19, снижали α-SMA, виментин, коллаген I и III в легочной ткани; уменьшали флуоресцентный позитивный процент CD68, Arg-1, iNOS, Wnt3a и β-катенина; снижали белковую и мРНК экспрессию Wnt3a и β-катенина (P<0,05, P<0,01). Выводы: формула Бусен Тунло может улучшать легочный фиброз, вызванный блеомицином у крыс, через подавление эпителиально-мезенхимального перехода и уменьшение избыточного отложения внеклеточного матрикса, возможно, путем ингибирования сигнального пути Wnt3a/β-катенин и связанной с ним поляризации макрофагов.

Формула Бусен Тунло;легочный фиброз;поляризация макрофагов;сигнальный путь Wnt3a/β-катенин