Механизм антиволокнистого действия настоя Инци Санхуан Цзэдо Тан через ингибирование внеклеточных ловушек нейтрофилов

LI Yanbo ,  

LEI Chao ,  

WU Qingjuan ,  

LYU Wenliang ,  

摘要

Цель исследования – проверить терапевтическое действие настоя Инци Санхуан Цзэдо Тан (YQSH) на модели печёночного фиброза у мышей, вызванного четырёххлористым углеродом (CCl₄), и исследовать, связано ли его действие с подавлением инфильтрации нейтрофилов и образования внеклеточных ловушек нейтрофилов (NETs). Метод: 36 мышей C57BL/6J случайным образом разделили на нормальную группу, модельную группу, группу положительного контроля силимарина (SF) (55 мг·кг-1·д-1), группы с низкой (YQSH-L), средней (YQSH-M) и высокой (YQSH-H) дозировками YQSH (8,325; 16,65; 33,3 г·кг-1·д-1) по 6 мышей в каждой. За исключением нормальной группы, остальным группам вводили CCl₄ в брюшную полость для вызова фиброза печени. После успешного моделирования в течение 8 недель всем группам лечения давали соответствующие препараты перорально. Использовали гематоксилин-эозин (HE), Sirius Red и окрашивание по Массону для оценки патологических изменений печени; цветное допплеровское ультразвуковое сканирование для измерения упругости печени; иммуногистохимию и количественную ПЦР в реальном времени (Real-time PCR) для определения экспрессии и уровня мРНК CXCL1, CXCL2 и CXCL5; проточную цитометрию для оценки уровня нейтрофилов; иммунная флуоресценция (IF) для сравнения экспрессии белков NE и MPO; иммуноферментный анализ (ELISA) для определения уровня MPO, NE и цитруллинированного гистона H3 (CitH3). Результаты: по сравнению с нормальной группой в группе модели обнаружено значительное воспалительное инфильтрование и отложение коллагена в печени, повышение упругости печени, экспрессии CXCL1, CXCL2, CXCL5, уровня нейтрофилов, а также уровней MPO, NE и CitH3 (P<0,05, P<0,01). По сравнению с группой модели лечение YQSH уменьшало воспалительную инфильтрацию и отложение коллагена в печени; снижало упругость печени (P<0,01); снижало экспрессию белков CXCL1, CXCL2, CXCL5 (P<0,01) и уровень мРНК (P<0,05, P<0,01); снижало уровень нейтрофилов (P<0,01); заметно снижало экспрессию MPO и NE (P<0,05, P<0,01); уменьшало уровни MPO, NE и CitH3 (P<0,05, P<0,01). Заключение: антифибротическое действие YQSH, возможно, связано с подавлением уровней хемокинов (CXCL1, CXCL2, CXCL5), уменьшением инфильтрации нейтрофилов и подавлением образования NETs.

关键词

печёночный фиброз;Инци Санхуан Цзэдо Тан;нейтрофилы;внеклеточные ловушки нейтрофилов;хемокины

阅读全文