Влияние рецепта «Бушэнь Хуатан» на регуляцию сигнального пути HIF-1 при аэробном гликолизе клеток MC3T3-E1

XIONG Mengxin ,  

CHEN Yingqing ,  

ZHANG Haoxue ,  

JIANG Zeyu ,  

XIANG Nan ,  

XU Jun ,  

DENG Ali ,  

摘要

Целью исследования было изучение влияния рецепта «Бушэнь Хуатан» на аэробный гликолиз эмбриональных остеобластов мыши MC3T3-E1 на основе сигнального пути факторa, индуцируемого гипоксией-1 (HIF-1), а также дальнейшее исследование механизма вмешательства рецепта при постменопаузальном остеопорозе (PMOP). Методы: клетки MC3T3-E1 разделили на контрольную группу, группы с низкой, средней и высокой концентрацией рецепта «Бушэнь Хуатан» (0,01, 0,05, 0,1 г/л), а также группу с иканнитиносидом (0,1 г/л). Активность остеогенеза и минерализации оценивавлась методом окрашивания щелочной фосфатазы (ALP) и красным альциановым (ARS); ультраструктурные изменения митохондрий и шероховатого эндоплазматического ретикулума остеобластов изучены методом трансмиссионной электронной микроскопии; экспрессия транскрипционных факторов Runx2 и Osterix определялась методом иммунофлюоресценции (IF); уровни пирувата (PA) и лактата (LA) в супернатанте клеток — методом иммуноферментного анализа (ELISA); внеклеточный кислотный показатель (ECAR) измерялся анализатором Seahorse XF96; экспрессия белков HIF-1α, HIF-1β, PDK1, HK2, PKM2 изучена методом вестерн-блоттинга; уровни мРНК для HIF-1α, HIF-1β, PDK1, HK2, PKM2 анализировались с помощью количественной ПЦР в реальном времени. Результаты: по сравнению с контрольной группой окрашивание ALP и ARS в клетках MC3T3-E1 в группах с лекарственными препаратами значительно увеличилось (P<0,05, P<0,01); произошло значительное расширение и увеличение количества шероховатого эндоплазматического ретикулума, а также увеличение числа лизосом; интенсивность флуоресценции Runx2 и Osterix заметно возросла (P<0,01); уровни PA и LA в супернатанте существенно повысились (P<0,01); ECAR значительно увеличился в течение тех же временных периодов (P<0,05); уровни экспрессии белков и мРНК HIF-1α, HK2, PDK1 и PKM2 были значительно повышены (P<0,05, P<0,01). Заключение: рецепт «Бушэнь Хуатан» может регулировать аэробный гликолиз остеобластов MC3T3-E1 через активацию сигнального пути HIF-1, способствуя формированию костной ткани.

关键词

рецепт Бушэнь Хуатан; постменопаузальный остеопороз; дифференцировка остеобластов; сигнальный путь фактора, индуцируемого гипоксией-1 (HIF-1); аэробный гликолиз

阅读全文

以上内容由讯飞翻译自动生成,翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果,本网站不承担任何商业和法律责任。

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website