Целью данного исследования является систематическая характеристика химических компонентов экстракта Кэтиньзы in vitro, а также определения вступающих в кровь прототипов и метаболитов в модели нейропатической боли (NP) с целью выяснения потенциальной фармакологической основы ее анальгезирующей активности. Для анализа компонентов 80%-го метанольного экстракта Кэтиньзы применялась высокоэффективная жидкостная хроматография с квадрупольным электростатическим орбитрап-ловушкой высокой разрешающей способности (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS). 36 мышей были разделены на контрольную группу, группы с низкой, средней и высокой дозами экстракта (25, 50, 100 мг/кг), группы аспирина (400 мг/кг) и морфина (10 мг/кг), по 6 животных в каждой, и оценивалась пороговая реакция на взмах хвоста; 24 мыши случайным образом распределены на контрольную группу и группы с низкой, средней и высокой дозами (25, 50, 100 мг/кг) для исследования координационной функции мышей, по 6 в каждой. Построена модель сшивания спинального нерва у мышей (SNL), где 24 мыши случайно разделены на группы ложной операции (Sham), SNL, SNL+экстракт Кэтиньзы (KB) (750 мг/кг) и SNL+прегабалин (20 мг/кг), по 6 мышей в группе для оценки механической и термической гиперчувствительности. Совместно с поведенческой оценкой определено оптимальное время начала анальгезирующего эффекта, в этот момент были собраны образцы плазмы. Систематическая идентификация компонентов, поступающих в кровь, и метаболитов осуществлялась на основе точной массы, тандемной масс-спектрометрии (MS/MS) вторичных фрагментов, времени удерживания, а также сопоставления с литературными данными и эталонными образцами; одновременно с сетевой фармакологией, анализом сходства мишеней и молекулярным докингом была оценена потенциальная роль компонентов в интервенции заболеваний. По сравнению с контрольной группой, в группе с высокой дозой экстракта Кэтиньзы и морфина порог болевой реакции значительно повысился (P<0,01), при этом координационная функция у здоровых мышей не изменялась; по сравнению с группой Sham, в группе SNL значительно снизились пороги механической и тепловой гиперчувствительности (P<0,01); по сравнению с группой SNL, группы SNL+KB и SNL+прегабалин показали значительное повышение порогов механической и тепловой гиперчувствительности (P<0,01); максимальный анальгезирующий эффект Кэтиньзы наблюдался через 2 часа после введения; in vitro идентифицировано 70 компонентов, в плазме обнаружено 22 прототипных компонента и 29 метаболитов. Основные мишени поступающих в кровь компонентов были в основном связаны с биологическими процессами восприятия и передачи болевых сигналов и имели высокое совпадение с генами, связанными с нейропатической болью; кроме того, многие компоненты обладали высокой связывающей способностью с основными мишенями боли. Учитывая содержание in vitro, уровень плазменной экспозиции и связь с мишенями, кетинамид A-β-D-пиранозид глюкозида и кэтинзьский гликозид были определены как наиболее представительные анальгезирующие фармакологические вещества. Заключение: данное исследование систематически раскрывает основу вмешательства Кэтиньзы в нейропатическую боль с трех аспектов: химического состава, поведения in vivo и целей, предоставляя важную теоретическую основу и экспериментальную поддержку для изучения ее механизма действия и разработки новых анальгезирующих средств.

Кэтиньза;нейропатическая боль;высокоэффективная жидкостная хроматография-квадруполь-электростатический орбитрап с высоким разрешением (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS);идентификация компонентов;сетевая фармакология