Цель исследования – изучить защитный механизм действия формулы Лянсюэ Туцзы, опосредованный путем Toll-подобного рецептора 4 (TLR4) / ядерного фактора транскрипции-κB (NF-κB) / белка рецептора NOD-подобного 3 (NLRP3) в контроле окислительного стресса при повреждении почек у модельных крыс с иммуноглобулиновым A васкулитом (IgAV). В работе использовали 50 самцов крыс линии Вистар пятинедельного возраста, которые были случайным образом разделены на контрольную группу (10 животных) и группу моделирования (40 животных). Для создания модели повреждения почек IgAV применяли модифицированный метод комбинации альбумина с геморрагическим эффектом. После успешного моделирования 30 крыс случайным образом распределили на группу модели IgAV, три экспериментальные группы с низкой, средней и высокой дозировками формулы Лянсюэ Туцзы (3,75, 7,5, 15 г/кг), группу ингибирования TLR4 (3 мг/кг) и контрольную группу, всего 6 групп по 6 животных в каждой, с четырехнедельным курсом лечения. Оценивали поведенческие изменения, состояние кожи (сыпь), а также количество белка и эритроцитов в суточной моче. Определяли уровни малонового диальдегида (MDA), восстановленного глутатиона (GSH), интерлейкина-18 (IL-18) и межклеточного молекулярного адгезивного комплекса-1 (ICAM-1) сыворотки с помощью ELISA и биохимических методов. Гистопатологические изменения почечной ткани исследовали с помощью гематоксилин-эозинового окрашивания. Иммунное флуоресцентное окрашивание использовали для обнаружения отложения IgA в почках. Относительный уровень экспрессии мРНК TLR4, NF-κB, NLRP3 и ASC, а также соответствующих белков, анализировали с помощью количественной ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга. В сравнении с контрольной группой у крыс модели IgAV наблюдалась геморрагическая сыпь, аналогичная кожным проявлениям у детей с IgAV, значительное повышение суточного белка и количества эритроцитов в моче (P<0,01), а также повышение уровней MDA, IL-18 и ICAM-1 (P<0,01) и снижение уровня GSH (P<0,01). Гистопатология выявила выраженный застой капилляров клубочков, лёгкую дегенерацию эпителиальных клеток почечных канальцев, их отёк и периваскулярный лимфоцитарный инфильтрат. Иммунное флуоресцентное окрашивание показало значительное повышение средней интенсивности IgA в мезангию клубочков (P<0,01). Экспрессия мРНК и белков TLR4, NF-κB p65, NLRP3 и ASC была значительно повышена (P<0,01). По сравнению с модельной группой у животных, получавших формулу Лянсюэ Туцзы и ингибитор TLR4, отмечалось явное исчезновение геморрагической сыпи; значительное снижение белка и эритроцитов в моче (P<0,05, P<0,01); снижение уровней MDA, IL-18 и ICAM-1 (P<0,05, P<0,01) и повышение GSH (P<0,01); улучшение микроциркуляции в клубочках, уменьшение дегенерации эпителия и инфильтрации лимфоцитов вокруг сосудов; уменьшение средней интенсивности IgA в мезангиальном участке (P<0,01); значительное снижение уровней мРНК TLR4, NF-κB p65, NLRP3 и ASC (P<0,05, P<0,01), с тенденцией к снижению мРНК NF-κB p65 в группе низкой дозировки формулы. Также наблюдалось снижение белковой экспрессии TLR4, p-NF-κB p65/NF-κB p65, NLRP3 и ASC (P<0,05, P<0,01), с выраженным снижением белков NLRP3 и ASC в группе низкой дозы (P<0,05) и тенденцией к снижению TLR4 и p-NF-κB p65/NF-κB p65. Вывод: Формула Лянсюэ Туцзы улучшает уровень белка и эритроцитов в моче, а также отложение IgA в мезангии клубочков, подавляет воспалительный ответ и сосудистый окислительный стресс, эффективно снижает повреждение эндотелия сосудов у крыс с моделью IgAV и замедляет прогрессирование заболевания. Механизм может заключаться в ингибировании сигнального пути TLR4/NF-κB/NLRP3, что способствует профилактике и лечению повреждения почек.

Иммуноглобулиновая A (IgA) васкулит; формула Лянсюэ Туцзы; Toll-подобный рецептор 4 (TLR4) / ядерный фактор транскрипции-κB (NF-κB) / белок рецептора NOD-подобного 3 (NLRP3); окислительный стресс; повреждение почек