Влияние отвара из пиона и лакричника на пролиферацию и дифференцировку нейрональных стволовых клеток у крыс с состоянием спастичности конечностей после инсульта
Целью является анализ степени повреждения мышечного тонуса у крыс в состоянии спастичности конечностей после инсульта, а также экспрессии белка Nestin и β-катенина в области коры головного мозга M1, исследование механизма действия отвара из пиона и лакричника в разных дозах на крыс с состоянием спастичности конечностей после инсульта (SCA). Методы: крыс случайным образом разделили на контрольную группу, модельную группу, группу с положительным контролем (баклофен, 5,25 мг/кг) и группы с низкой, средней и высокой дозами отвара (2,1, 4,2, 8,4 г/кг) из пиона и лакричника, по 9 на группу. Модель спастичности конечностей после инсульта была создана с помощью модифицированного метода фотостимуляции и инъекции безводного этанола в внутреннюю капсулу. После подтверждения успеха моделирования по шкале поведения проводилось лекарственное вмешательство. Оценивали неврологический дефицит, мышечный тонус, двигательную активность в открытом поле, структуру синапсов с помощью трансмиссионной электронной микроскопии, изменения мышечных волокон скелетной мускулатуры с помощью окрашивания ATP-азы, морфологические изменения ткани с помощью гематоксилин-эозина (HE), иммуноцитохимический анализ, количественную ПЦР в реальном времени и вестерн-блотинг для определения уровней Nestin и β-катенина мРНК и белков в коре головного мозга M1. Результаты: по сравнению с контрольной группой у крыс модели наблюдалось значительное увеличение оценок неврологического дефицита и мышечного тонуса (P<0,01), значительное уменьшение дистанции передвижения в открытом поле (P<0,01), отек и размытость синаптических структур, серьезное повреждение клеток коры, значительное увеличение доли ATP-азных волокон типа I скелетных мышц (P<0,01), значительное снижение уровней Nestin мРНК и белка (P<0,01), значительное увеличение уровней β-катенина мРНК и белка (P<0,01). По сравнению с модельной группой отвар из пиона и лакричника значительно снижал оценки неврологического дефицита и мышечного тонуса у крыс SCA (P<0,01), значительно увеличивал дистанцию передвижения (P<0,01). Трансмиссионная электронная микроскопия показала более четкую и целостную синаптическую структуру, большее количество и улучшенную форму в группе лечения, окраска HE показала целостную и упорядоченную структуру нейронов, уменьшение количества вакуолизированных клеток, окраска ATP-азы показала снижение доли мышечных волокон типа I (P<0,01). Реальная ПЦР показала значительное повышение экспрессии мРНК Nestin и β-катенина (P<0,01), иммуногистохимия и вестерн-блотинг продемонстрировали значительное повышение уровня белков Nestin и β-катенина (P<0,05, P<0,01). Вывод: Отвар из пиона и лакричника, возможно, улучшает неврологический дефицит и спастичность конечностей у моделей SCA за счет регуляции пролиферации и дифференцировки нейрональных стволовых клеток в корковой области M1.
关键词
отвар из пиона и лакричника;инсульт;состояние спастичности конечностей;нейрональные стволовые клетки;клеточная дифференцировка