Цель: исследовать роль синтеза длинноцепочечного ацил-КоА-синтетазы 4 (ACSL4), опосредующей β-окисление жирных кислот в митохондриях, в механизме действия формулы Shugan Bushen Yulin Tang (疏肝补肾毓麟汤) по улучшению подвижности сперматозоидов у крыс с застоем печени. Методы: 40 самцов крыс SD случайным образом разделены на нормальную группу, модельную группу, высокодозную и низкодозную группы формулы Shugan Bushen Yulin Tang (26 и 13 г/кг) и группу флуоксетина (1,8 мг/кг). Лечение проводили перорально. За исключением нормальной группы, модели застоя печени формировали с помощью хронического ограничения движений и раздражения хвоста. После моделирования проводили лечение соответствующими препаратами в течение 21 дня. Уровни кортикостерона (CORT), тестостерона (T) и эстрадиола (E2) в сыворотке определяли методом ИФА (ELISA). Вес тела, яичек и придатка яичка измеряли аналитическими весами, рассчитывали индексы яичек и придатка. Концентрацию и подвижность сперматозоидов определяли автоматизированной системой анализа спермы. Гистологические изменения яичек оценивали с помощью окрашивания гематоксилин-эозином (HE). Мембранный потенциал митохондрий анализировали с помощью проточной цитометрии с использованием флуоресцентного зонда JC-1. Изменения липидного метаболизма в сперме исследовали методом ЖХ-МС (LC-MS), отбирали дифференциальные метаболиты. Активность ацетил-КоА, ацил-КоА и уровень АТФ определяли методом ELISA. Экспрессию ACSL4 в тестикулах выявляли методом иммуногистохимического флуоресцентного окрашивания (IF), а уровень белков ACSL4 и CPT1 - методом вестерн-блоттинга (Western blot). Результаты: По сравнению с нормальной группой методом LC-MS выявлено 24 дифференциальных липидных метаболита, после лечения формулой Shugan Bushen Yulin Tang 11 из них были повышены; анализ путей показал преимущественное вовлечение синтеза и метаболизма жирных кислот. В модельной группе отмечалось значительное снижение плотности и подвижности сперматозоидов, индекса придатка, мембранного потенциала митохондрий, активности ацетил-КоА, ацил-КоА и содержания АТФ, а также экспрессии ACSL4 и CPT1 (P<0,01). По сравнению с модельной группой в группах с лечением наблюдалось значительное повышение перечисленных показателей (P<0,01), а уровень белков ACSL4 и CPT1 значительно увеличился (P<0,05, P<0,01). Вывод: Формула Shugan Bushen Yulin Tang улучшает подвижность сперматозоидов у крыс с застоем печени, активируя ACSL4-опосредованное митохондриальное β-окисление жирных кислот и увеличивая синтез АТФ.

Shugan Bushen Yulin Tang;эмоции;застой печени;подвижность сперматозоидов;митохондрии;β-окисление жирных кислот