Изучение роли и механизма Шуган Бушэнь Юлин Тан в повышении подвижности спермы у крыс с застойным состоянием печени на основе бета-окисления жирных кислот

DENG Chaoyang ,  

XIAO Min ,  

JIANG Xiaocui ,  

WANG Chaoyang ,  

LYU Yinjuan ,  

SHU Jinsong ,  

ZHOU Yanyan ,  

YU Xiaoming ,  

摘要

Целью исследования было изучение воздействия и механизма действия формулы Шуган Бушэнь Юлин Тан на повышение подвижности спермы у крыс с застойным состоянием печени на основе ацил-КоА синтетазы 4 (ACSL4), участвующей в митохондриальном бета-окислении жирных кислот. Методы: 40 самцов крыс SD случайным образом были разделены на нормальную группу, модельную группу, группы с высоким и низким дозированием Шуган Бушэнь Юлин Тан (26, 13 г·кг-1) и группу флуоксетина (1,8 мг·кг-1). Медикаменты вводились через зонд. За исключением нормальной группы, у остальных групп моделировался застой печени при помощи хронического ограничения движений в сочетании с раздражением хвоста. После завершения моделирования каждая группа получала соответствующее лечение в течение 21 дня подряд. С помощью иммуноферментного анализа (ELISA) измеряли уровни кортикостерона (CORT), тестостерона (T) и эстрадиола (E2) в сыворотке крови. Определяли массу тела, массу яичек и придатка яичка с помощью электронных аналитических весов, рассчитывали индекс яичка и придатка. Автоматизированная система анализа спермы использовалась для определения концентрации и подвижности сперматозоидов. Гистологические изменения оценивались с помощью гематоксилин-эозинового (HE) окрашивания тканей яичек. Использовали проточную цитометрию и флуоресцентные зонды, включая JC-1, для анализа потенциала мембраны митохондрий сперматозоидов. При помощи жидкостной хромато-масс-спектрометрии (LC-MS) исследовали изменения липидного метаболизма сперматозоидов и отбирали дифференциальные метаболиты. Элиминация ацетил-КоА (Acetyl-CoA), ацила-КоА (Acyl-CoA) и уровень аденозинтрифосфата (АТФ) исследовались методом ELISA. Иммунофлуоресцентным методом определяли экспрессию ACSL4 в тканях яичек. Вестерн-блоттинг применялся для определения уровней белков ACSL4 и карнитин-пальмитоилтрансферазы 1 (CPT1) в тканях яичек. В сравнении с нормальной группой LC-MS выявил 24 различающихся метаболита жирных кислот; после интервенции Шуган Бушэнь Юлин Тан было повышено 11 из них. Анализ путей показал основное вовлечение биосинтеза и метаболизма жирных кислот. По сравнению с нормальной группой у модельных крыс существенно снижались плотность и активность сперматозоидов, индекс придатка, потенциал митохондриальной мембраны, активность Acetyl-CoA, Acyl-CoA, содержание АТФ, а также уровни белков ACSL4 и CPT1 (P<0.01). По сравнению с модельной группой у групп, получавших Шуган Бушэнь Юлин Тан, показатели плотности и активности сперматозоидов, индекс придатка, потенциал митохондриальной мембраны, активность Acetyl-CoA, Acyl-CoA, содержание АТФ значительно повысились (P<0.01), также значительно увеличилась экспрессия белков ACSL4 и CPT1 (P<0.05, P<0.01). Заключение: Шуган Бушэнь Юлин Тан может улучшать подвижность спермы у крыс с застойным состоянием печени, активируя ACSL4-опосредованное митохондриальное бета-окисление жирных кислот, повышая синтез АТФ.

关键词

Шуган Бушэнь Юлин Тан;эмоции;застой печени;подвижность спермы;митохондрии;бета-окисление жирных кислот

阅读全文