Цель - исследовать механизм действия отвара дахуан ганьцао посредством деацетилирования опухолевого белка p53 при помощи сиртуина 3 (SIRT3) для ослабления железосмертности (ферроптоза) при хронической болезни почек (ХБП). Методы: в экспериментах in vivo была создана модель ХБП у мышей путем кормления пищей с 0,2% аденин. 72 мыши C57BL/6 были случайным образом разделены на контрольную группу, модельную группу, группы с низкой, средней и высокой дозами отвара дахуан ганьцао (0,975, 1,95, 3,90 г/кг) и группу с валсартаном (0,025 г/кг), по 12 животных в каждой. Оценивалась функция почек путем измерения сывороточного азота мочевины (BUN) и креатинина (SCr); патологию почек изучали с помощью окраски гематоксилин-эозином (HE), периодической кислотой-Шиффом (PAS) и Массоном; фиброз почек оценивали по экспрессии коллагена I типа (ColⅠ), коллагена III типа (ColⅢ) и α-гладкомышечного актина (α-SMA) с помощью иммуногистохимии; воспалительный ответ определяли по уровню провоспалительных факторов сыворотки, включая фактор некроза опухоли α (TNF-α), интерлейкин-1β (IL-1β) и интерлейкин-6 (IL-6) методом ELISA; уровни супероксиддисмутазы (SOD), малонового диальдегида (MDA), глутатиона (GSH) и общего железа в почечной ткани использовали для оценки липидной пероксидации и метаболизма железа; экспрессия белков SIRT3/p53, ac-p53 и глутатионпероксидазы 4 (GPX4) оценивалась методом вестерн-блоттинга. В экспериментах in vitro модель ферроптоза HK-2 клеток индуцировали эрастином (Erastin), делили на контрольную группу, модельную группу, три группы с низкой, средней и высокой дозой сыворотки с лекарственным отваром дахуан ганьцао (15 крыс случайно разделены на 3 группы по 5 в каждой, даваемые 0,675, 1,35, 2,70 г/кг перорально) и группу с ферроптозным ингибитором Fer-1 (5 мкмоль/л). Выживаемость клеток оценивали методом CCK-8 для определения оптимальной дозы эрастина и терапевтической дозы отвара; экспрессию белков SIRT3/p53, ac-p53 и GPX4 анализировали вестерн-блотом; локализацию p53 изучали методом иммунофлуоресцентной конфокальной микроскопии. Результаты: в экспериментах in vivo у модели значительно повысился уровень BUN и SCr по сравнению с контролем (P<0,01), отмечали серьезные повреждения почек и прогрессирование фиброза. Липидная перекись, нарушения железного обмена проявлялись значительным снижением SOD, GSH и повышением MDA, общего железа (P<0,05, P<0,01). После градиентного вмешательства отваром дахуан ганьцао данные показатели существенно улучшились (P<0,05, P<0,01). В экспериментах in vitro выживаемость клетки HK-2 значительно снизилась в модельной группе по сравнению с контролем, оптимальная индукционная доза эрастина составила 0,4 мкмоль/л, а высокая доза сыворотки отвара была лучшей терапевтической дозой. В группе с лекарственным серумом все дозы значительно повысили выживаемость (P<0,05, P<0,01). Механистические исследования выявили значительное снижение экспрессии белков SIRT3 и GPX4 и значительное увеличение экспрессии p53, ac-p53 и ядерной локализации p53 в моделях (P<0,01). После вмешательства отваром эти изменения значительно обратимы (P<0,05, P<0,01). Вывод: отвар дахуан ганьцао оказывает защитное действие против ферроптоза в модели ХБП на мышах, индуцированной аденином, и в клетках HK-2, индуцированных эрастином, его механизм связан с антиферроптозным эффектом, опосредованным сигнализацией SIRT3/p53.

отвар дахуан ганьцао; хроническая болезнь почек; ферроптоз; сиртуин 3 (SIRT3); деацетилирование