Целью данного исследования является изучение противопсориатической активности и потенциального механизма действия раствора 康复新液 (KFX) in vitro для предоставления экспериментальных доказательств его противопсориатического эффекта. Метод: сначала клетки бессмертных кератиноцитов человека HaCaT без индукции разделили на 7 групп: контроль и 6 групп с разными концентрациями KFX (5, 10, 20, 40, 80, 160 г/л). После обработки различными концентрациями KFX использовали набор CCK-8 для оценки влияния на пролиферацию нормальных клеток. Далее HaCaT без индукции разделили на 6 групп: контроль и 5 групп с разными дозами rh-IL-17A (5, 10, 50, 100, 120 г/л). После обработки реорганизованным человеческим интерлейкином-17A (rh IL-17A) оценили влияние на пролиферацию и выбрали оптимальную дозу. Потом нормальные клетки HaCaT разделили на контроль и группы с KFX (5, 10, 20, 40, 80, 160 г/л), кроме контроля в остальных группах с оптимальной дозой rh IL-17A была построена модель псориатических клеток для оценки влияния KFX на пролиферацию. Наконец, не индуцированные HaCaT разделили на шесть групп: контроль, rh IL-17A, MTX и 3 группы с разными концентрациями KFX (20, 40, 80 г/л). Во всех, кроме контроля, с помощью оптимальной дозы rh IL-17A была создана модель псориатических клеток; после лечения препаратами оценивали миграцию клеток с помощью анализа царапины и выражение mRNA Ki-67, S100A7, S100A8, S100A9 методом количественной ПЦР в реальном времени для комплексной оценки противопсориатической активности KFX. Также исследовали относительное выражение воспалительных факторов IL-1β, IL-6, CXCL-20 и уровни белков JAK3, p-JAK3, STAT3, p-STAT3 с целью определения механизма действия. Результаты: по сравнению с контролем воздействие KFX в концентрации 80 г/л спустя 72 ч (P<0.05) и 160 г/л в разные моменты значимо влияли на пролиферацию HaCaT (P<0.01). Другие концентрации не оказывали заметных изменений формы и пролиферации, свидетельствуя о безопасности KFX. После 24 ч обработки rh IL-17A пролиферация значительно усиливалась, при концентрации 100 мкг/л активность была максимальной (P<0.05) с почти 100% плотностью и нормальной морфологией, что указывает на оптимальную концентрацию для индукции. Обработка KFX псориатических клеток, индуцированных rh IL-17A, существенно подавляла их пролиферацию (P<0.01), миграцию (P<0.01) и относительное выражение Ki67, S100A7, S100A8, S100A9 mRNA (P<0.01). KFX также снижал относительное выражение IL-1β, IL-6, CXCL-20 (P<0.01) и фосфорилирование белков JAK3, STAT3 (P<0.05, P<0.01). Вывод: KFX не оказывает явной токсичности на неиндуцированные HaCaT, подавляет пролиферацию и миграцию псориатических HaCaT, индуцированных rh IL-17A, обладает выраженной противопсориатической активностью in vitro, вероятно, за счет регуляции вниз сигнального пути JAK3/STAT3 и подавления фосфорилирования белков.

псориаз;康复新液;клеточная пролиферация;миграционная способность;воспалительные факторы;тирозин киназа 3 (JAK3)/ сигнальный путь активатора транскрипции 3 (STAT3)