Целью исследования является подтверждение потенциальных активных компонентов и механизмов действия настоя Цаньци Дихуантан с помощью сетевой фармакологии и in vivo экспериментов при лечении диабетической болезни почек (DKD). Методология включала использование сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии, квадрупольного электростатического орбитального ловца высокой разрешающей способности (UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) для определения основных активных компонентов настоя. С помощью аннотаций генов (GO) и базы данных Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) предсказан механизм действия настоя. Был создан мужской мышиный модель DKD db/db, случайно разделённый на группы: модель, низкая (6.10 г/кг), средняя (12.19 г/кг) и высокая доза настоя, группа дапаглифлозина (1.25 мг/кг), нормальная группа C57BL/6J. Проведено 8-недельное лечение. Отмечали динамику массы тела, уровень натощак глюкозы (FBG), проводили OGTT и ITT. Биохимический анализ сыворотки крови выявил уровни SCr, BUN, UA, ALB, TP, суточное количество белка в моче. Гистологический анализ использовались окраски HE, PAS, Masson, иммуногистохимия для оценки экспрессии нефрина, Western blot для TGF-β1, Smad2/3, α-SMA, N-Cadherin, Snail и др. Результаты: выявлено 384 активных вещества, 44 ключевых компонента отобраны по биодоступности ≥30%. Найдено 169 общих мишеней, связанных с DKD, включая TNF, IL-6, Akt1, Caspase-3, JUN, HIF-1α, Bcl-2, MMP-9, IL-1β, TGF-β1. GO-аннотация включает мембранные рафты, внеклеточный матрикс, связывание ДНК, Р-Smad и функцию Smad, реакции на LPS и заживление ран. KEGG выявил пути липидов и атеросклероза, TGF-β, PI3K/Akt. Эксперименты показали значительное снижение FBG, улучшение OGTT, ITT, снижение SCr, BUN, UA, белка в моче; увеличение ALB, TP. Гистология показала уменьшение мезангиальной матрицы и коллагена, повышение нефрина. Western blot показал уменьшение TGF-β1, Smad2/3, подавление α-SMA, N-Cadherin, Snail. Вывод: Ингредиенты настоя могут препятствовать EMT почек через ингибирование сигнального пути TGF-β1/Smad, улучшая почечный фиброз при DKD; необходимы дальнейшие исследования.

Цаньци Дихуантан; диабетическая болезнь почек; почечный фиброз; эпителиально-мезенхимальный переход; фактор роста TGF-β1 (TGF-β1)/Smad