Целью является оптимизация метода экстракции полисахаридов репы, анализ и оценка первичной структуры выделенного и очищенного компонента (BP-1), а также его гипогликемического действия на диабетических зебрафиш. Для оптимизации процесса использовали полу-бимиметический метод с оценкой выхода полисахаридов, исследовали три фактора: соотношение материала и жидкости, время и температуру экстракции с помощью одномерного анализа и метода Бокс-Бенкена. Для выделения и очистки BP-1 применяли метод Севажа и колонку DEAE-52 целлюлозы. Чистоту, состав моносахаридов, тройную спиральную структуру и функциональные группы определяли с помощью УФ-видимой спектрофотометрии (UV), ГХ-МС (GC-MS), теста с конго красным, ИК-спектроскопии (FT-IR); микроструктуру исследовали методом сканирующей электронной микроскопии (SEM) и атомно-силовой микроскопии (AFM). Зебрафиш разделяли на контрольную группу и группы BP-1 с концентрациями 1, 10, 50, 200, 1000 мг·л-1; проводили 96-часовой экспозиционный тест. Для создания модели диабета использовали диабетическую индукцию глюкозой и тетрахинолином, дальнейшее введение BP-1 в разных дозах. Методом ELISA определяли содержание глюкозы и инсулина, гистологически оценивали влияние на печень (HE окраска), а также уровни экспрессии генов глюкагона, инсулина и PCK1 методом qPCR в реальном времени. Лучшие условия экстракции: соотношение материал:жидкость 1:40, время 66 мин, температура 79°C, выход полисахаридов (10.34 ± 0.96)%. UV-спектры показали отсутствие белков и нуклеиновых кислот в BP-1; GC-MS выявил наличие арабинозы, рамнозы, рибозы, маннозы, галактозы и глюкозы; тест конго-красным не доказал наличие тройной спиральной структуры; FT-IR показал присутствие α-гликозидных связей и уроновых кислот; SEM выявил неправильную пластинчатую структуру, гладкую поверхность; AFM показал агрегаты вследствие взаимодействия цепей и внутримолекулярных водородных связей. Максимально переносимая концентрация BP-1 для зебрафиша 200 мг/л. Клинические данные демонстрируют значительное снижение глюкозы и повышение инсулина в группе BP-1-50 по сравнению с моделью (p < 0.05). Гистопатологический анализ показал восстановление структуры печени с BP-1, особенно в группе BP-1-200. qPCR выявил значительное изменение экспрессии гена Glucagon, PCK1 и Insa в моделях и группах лечения (p < 0.01). Выводы: полу-бимиметический метод является эффективным, простым и экономичным для промышленного производства. Полисахарид BP-1 состоит из шести моносахаридов, содержит α-гликозидные связи и уроновые кислоты, обладает гипогликемической активностью и защитным эффектом на печень диабетической модели зебрафиш.

полисахариды репы;полу-бимиметический метод;характеризация структуры;гипогликемическая активность;оптимизация технологии;диабет