Цель: на основе оценки фармакодинамики, с использованием метода G1-энтропийных весов и метода отклика поверхности Бокса-Бенкена, оптимизировать и верифицировать оптимальный процесс двойного спиртово-водного экстрагирования кастомизированного настоя с половинчатым перифитом (MBXT), а также системно и всесторонне проанализировать химическую основу фармакологического действия данного состава для обеспечения научной базы контроля качества и промышленного производства. Метод: крысы случайным образом распределялись на группы контроля, модели, метформина и три группы экстракта MBXT — полный водный экстракт, осажденный спиртом водный экстракт и двойной спиртово-водный экстракт. За исключением группы контроля, у остальных групп моделировали поликистозный синдром яичников с инсулинорезистентностью (PCOS-IR) с помощью диеты с высоким содержанием жиров и введения летрозола. Использовали иммуноферментный анализ (ELISA) и гематоксилин-эозиновое окрашивание (HE) для сравнения уровней гормонов крови и патологической морфологии яичников с целью выбора оптимального базового процесса экстракции; дополнительно применяли метод G1-энтропийных весов для построения комплексной оценки на основе коэффициентов переноса берберина гидрохлорида и баикалина, оптимизировали параметры спиртового и водного экстрагирования с помощью метода отклика поверхности Бокса-Бенкена; наконец, использовали сверхвысокоэффективную жидкостную хроматографию с квадрупольным масс-спектрометром с орбитальным ловушкой высокого разрешения (UPLC-Q-Orbitrap-MS) для качественного анализа химического состава оптимального образца. Результаты: фармакодинамические данные показали, что по сравнению с контрольной группой уровень тестостерона (T) и лютеинизирующего гормона (LH) в сыворотке модельной группы значительно повысился, уровень эстрадиола (E2) и фолликулостимулирующего гормона (FSH) заметно снизился (P<0,01), а яичники имели поликистозные изменения; по сравнению с модельной группой у всех групп с лечением наблюдалась значительная обратная динамика гормональных изменений, при этом группа с двойным спиртово-водным экстрактом показала наилучшее улучшение показателей и патологической морфологии, далее была проведена оптимизация процесса. В оптимизированном процессе двойного экстрагирования на основе метода Бокса-Бенкена спиртовая экстракция проводилась 70% этанолом, при соотношении растворителя 12:1, 120 минут, 2 раза; водяная экстракция — при соотношении 12:1, 90 минут, 3 раза. Верификация показала, что средний коэффициент переноса берберина гидрохлорида и баикалина составил 76,05% и 93,38% соответственно. В масс-анализе было идентифицировано всего 377 соединений, включая 112 флавоноидов, 41 терпеноид, 28 органических кислот, 22 кумарина и 8 алкалоидов, а также проанализированы закономерности фрагментации ключевых компонентов. Заключение: выбранный процесс двойного спиртово-водного экстрагирования является стабильным и жизнеспособным, эффективно сохраняет фармакологическую основу лечения PCOS-IR MBXT и уточняет состав основных химических компонентов формулы, предоставляя научную базу для разработки лекарственных форм и контроля качества.

Синдром поликистозных яичников (PCOS); фармакодинамическое исследование; процесс экстракции; метод отклика поверхности Бокса-Бенкена; анализ материальной основы