Целью является изучение влияния гранул Хэцзунсяопи (HZXPG) на апоптоз клеток желудочной слизистой человека, вызванный N-метил-N’-нитро-N-нитрозогуанидином (MNNG), а также механизм стресса эндоплазматического ретикулума, опосредованного осью Никлин (Ncln)-C/EBP гомологичный белок (CHOP). Методы: с помощью теста на пролиферацию и жизнеспособность клеток (CCK-8) оценена ингибирующая активность MNNG на пролиферацию клеток GES-1 для выбора оптимальной дозы MNNG. Клетки слизистой желудка GES-1 были разделены на контрольную группу, модельную группу (MNNG 1.5625 ммоль/л), группы с низкой и высокой дозами HZXPG (5% и 10% лекарственной сыворотки). При помощи окрашивания циклическим пептидом Говарда исследованы морфологические изменения клеток слизистой желудка, вызванные MNNG. Использовано окрашивание методом TUNEL для оценки апоптоза, проточная цитометрия с флуоресценцией фосфолипида V/иодид пропидия (Annexin V/PI) для выявления изменений клеточного цикла апоптоза, вестерн-блоттинг для определения экспрессии белков, связанных с апоптозом, стрессом ретикулума и осью Ncln/CHOP. Результаты: по сравнению с контролем в модельной группе площадь поверхности клеток GES-1 значительно снижена, наблюдалось расширение эндоплазматического ретикулума и значительное повышение раннего и позднего апоптоза, а также увеличение экспрессии tBid, Bax, клириваированных каспаз-3 и каспаз-8, при этом уровень Bcl-2 значительно уменьшился (P<0.01). Были повышены уровни BiP, Ncln, CHOP (P<0.01), при этом наблюдалось увеличение экспрессии Ncln в эндоплазматическом ретикулуме и CHOP в ядре клетки. По сравнению с модельной группой, введение HZXPG в высокой дозе значимо увеличило площадь поверхности клеток слизистой, уменьшило расширение эндоплазматического ретикулума, снизило общий, ранний и поздний апоптоз (P<0.01). В группе с низкой дозой наблюдалось значительное снижение выраженности tBid и Bax (P<0.05, P<0.01), а также значительное увеличение Bcl-2 (P<0.01); в высокой дозе – снижение tBid, Bax, клириваированных каспаз-3 и -8 (P<0.05, P<0.01), и увеличение Bcl-2 (P<0.05). Уровни BiP, Ncln, CHOP значительно снижены в группе высокой дозы (P<0.05, P<0.01), а ядерная локализация CHOP уменьшилась. Вывод: HZXPG может уменьшать апоптоз клеток желудочной слизистой, вызванный стрессом эндоплазматического ретикулума под действием MNNG, ингибируя ось Ncln-CHOP и тем самым снижая повреждение клеток при предраковых состояниях желудка.

Гранулы Хэцзунсяопи;Хронический атрофический гастрит;Предраковые изменения желудка;Эндоплазматический стресс;Апоптоз;Ось никлина (Ncln)/гомологичного белка C/EBP (CHOP)