Исследование влияния тоника Рунму Дихуан Тан на сухой глаз у крыс с недостаточностью инь печени и почек в перименопаузальный период на основе сигнального пути SIRT3/HIF-1α/NF-κB

TIAN Sainan ,  

MA Wei ,  

CHEN Yao ,  

CAO Yu ,  

LIU Guicheng ,  

LIU Pei ,  

LEI Junxian ,  

PENG Qinghua ,  

PENG Jun ,  

摘要

Целью исследования было изучение механизма действия тоника Рунму Дихуан Тан (RMDHT) при лечении синдрома сухого глаза, связанного с недостаточностью инь печени и почек в периоды перименопаузы, через сигнальный путь SIRT3 / HIF-1α / NF-κB. Методы: 60 самок крыс SD были случайным образом разделены на группу ложной операции, группу модели, группу глазных капель гиалуроновой кислоты и три группы с низкими, средними и высокими дозами RMDHT (5.625, 11.25, 22.50 г·кг^-1) по 10 животных в каждой. За исключением группы ложной операции, у остальных была двухсторонняя овариэктомия с одновременным использованием глазных капель с 0.1% бензалкония хлоридом и длительным хроническим раздражением для создания модели сухого глаза, связанного с недостаточностью инь печени и почек. Лечение начинали на 11-й неделе после моделирования и проводили в течение 21 дня подряд. Оценивалось общее состояние животных, баллы теста с сеткой, объем слезопродукции, время разрушения слезной пленки, окрашивание роговицы флюоресцеином. Методом иммуноферментного анализа (ELISA) измеряли уровни активных форм кислорода (ROS), фолликулостимулирующего гормона (FSH), эстрадиола (E2) и прогестерона (PROG). Гистопатологическое исследование слезной железы, роговицы и матки проводилось с помощью гематоксилин-эозина (HE). Выраженность белков SIRT3, HIF-1α, фосфорилированного (p)-NF-κB p65 и NF-κB p65 исследовали методом вестерн-блоттинга в слезной железе. Иммуноцитохимия (IHC) применялась для выявления воспалительных факторов интерлейкина-1β (IL-1β) и фактора некроза опухоли α (TNF-α). Результаты: после моделирования, за исключением группы ложной операции, статистических различий между группами не было. По сравнению с группой ложной операции, остальные группы характеризовались вялостью, пониженной реактивностью, легкой раздражительностью, снижением массы тела, повышением температуры, снижением баллов теста с сеткой, уменьшением слезопродукции и значительным сокращением времени разрушения слезной пленки (P<0.05). После лечения у групп, принимавших гиалуронат натрия и RMDHT, улучшилось общее состояние, значительно увеличилась слезопродукция (P<0.05), увеличилось время разрушения слезной пленки (P<0.05), повысились баллы теста с сеткой (P<0.05), значительно снизились уровни ROS и FSH в сыворотке, повысились уровни E2 и PROG (P<0.05). Гистопатологические повреждения роговицы, слезной железы и матки улучшились. Экспрессия белков SIRT3 и HIF-1α значительно повысилась (P<0.05), а уровни p-NF-κB p65, IL-1β и TNF-α значительно снизились (P<0.05). Вывод: RMDHT способствует увеличению слезопродукции и времени разрушения слезной пленки в модели сухого глаза с недостаточностью инь печени и почек у крыс в перименопаузе, улучшает повреждения слезной железы и роговицы, облегчает симптомы сухого глаза. Механизм может быть связан с регуляцией сигнального пути SIRT3/HIF-1α/NF-κB, подавлением оксидативного стресса и воспаления, а также уменьшением повреждения поверхностных тканей глаза.

关键词

Тонік Рунму Дихуан Тан; Сухой глаз в перименопаузе; Недостаточность инь печени и почек; SIRT3 / HIF-1α / NF-κB сигнальный путь

阅读全文