Целью исследования было изучение механизма действия препарата Сымяо Вань, который через ингибирование ферроптоза улучшает функцию кишечной экскреции мочевой кислоты у крыс с гиперурикемией (HUA) на основе сигнального пути переносчика растворимых веществ семейства 7 члена 11/глутатионпероксидазы 4 (SLC7A11/GPX4). Методика: 48 самцов крыс SD были случайным образом разделены на нормальную группу, модельную группу, группу с низкой и высокой дозой Сымяо Вань (282,6 и 565,2 мг/кг), группу этококсиба (5,4 мг/кг), группу ингибитора ферроптоза (Fer-1) (2 мг/кг). За исключением нормальной группы, остальные группы получили внутрибрюшинные инъекции калия оксоната (100 мг/кг) и перорально гипоксантин (500 мг/кг) для создания модели HUA. Через 21 день каждой группе назначали соответствующие дозы препаратов перорально, группе Fer-1 – внутрибрюшинные инъекции Fer-1, нормальной и модельной группам – изотонический раствор равного объема. После забора образцов проводили биохимическое определение уровней сывороточной мочевой кислоты (SUA), креатинина (Cr), мочевины (BUN); определяли содержание ионов железа (Fe2+), восстановленного глутатиона (GSH), малонового диальдегида (MDA) и активность супероксиддисмутазы (SOD) в ткани подвздошной кишки; окрашивание гематоксилином и эозином (HE) для наблюдения патологических изменений ткани; трансмиссионная электронная микроскопия для оценки изменений митохондрий; иммуногистохимия (IHC) и вестерн-блоттинг для изучения экспрессии белков GPX4, тяжелой цепи ферритина 1 (FTH1), ацил-КоА синтетазы длинноцепочечного семейства 4 (ACSL4), SLC7A11 и ATP-связывающего кассетного транспортера G2 (ABCG2); количественная ПЦР в реальном времени для анализа мРНК GPX4, FTH1, ACSL4, SLC7A11, ABCG2 в ткани подвздошной кишки. Результаты: по сравнению с нормальной группой у модельной группы значительно повысились уровни SUA, Cr и BUN (P<0,01), содержание MDA и Fe2+ в ткани подвздошной кишки значительно увеличилось, а уровень GSH и активность SOD резко снизились (P<0,01); окрашивание HE показало обширное слущивание эпителия ворсинок, нарушение структуры ворсинок и неупорядоченность расположения, частичные повреждения ткани; электронная микроскопия выявила уменьшение объема митохондрий, уменьшение или исчезновение крист, характерные ультраструктурные признаки ферроптоза; молекулярный анализ и иммуногистохимия показали значительное снижение экспрессии белков и мРНК GPX4, FTH1, SLC7A11 и ABCG2, в то время как экспрессия ACSL4 была значительно повышена (P<0,05, P<0,01). По сравнению с модельной группой после интервенции Сымяо Вань уровни сывороточного UA, Cr и BUN заметно снизились (P<0,05, P<0,01), содержание MDA и Fe2+ в ткани подвздошной кишки значительно уменьшилось (P<0,01), уровень GSH и активность SOD значительно возросли (P<0,01); окрашивание HE показало значительное снижение слущивания эпителия ворсинок, улучшение структуры ворсинок и более регулярное их расположение, заметное улучшение повреждения тканей; электронная микроскопия выявила уменьшение повреждений митохондрий, улучшение уменьшения объемов митохондрий, частичное восстановление крист; молекулярный анализ и иммуногистохимия показали, что Сымяо Вань дозозависимо повышает экспрессию GPX4, FTH1, SLC7A11 и ABCG2, снижая экспрессию ACSL4 (P<0,05, P<0,01), при этом улучшения были статистически значимыми в группе с высокой дозой, а в группе с низкой дозой наблюдалась тенденция к улучшению экспрессии FTH1 мРНК, SLC7A11 мРНК и ABCG2 белка. Вывод: Сымяо Вань возможно подавляет ферроптоз эпителиальных клеток подвздошной кишки посредством регуляции сигнального пути SLC7A11/GPX4, повышает экспрессию белка транспортера мочевой кислоты ABCG2, способствуя тем самым кишечной экскреции мочевой кислоты и улучшая гиперурикемию.

Сымяо Вань; гиперурикемия; кишечная экскреция мочевой кислоты; переносчик растворимых веществ семейства 7 члена 11/глутатионпероксидаза 4 (SLC7A11/GPX4); ферроптоз; ATP-связывающий кассетный транспортер G2 (ABCG2)