Целью исследования было систематическое выявление основных химических компонентов гранул Линггуй Шугань (LGZGG) и изучение их фармакологической основы для лечения метаболического ассоциированного стеатогепатита (MASH). В качестве метода применялся ультравысокоэффективная жидкостная хроматография с квадруполем и временем пролёта масс-спектрометрия (UPLC-Q-TOF-MS/MS) для системного анализа химического состава LGZGG; с использованием технологии сетевого анализа мишеней строилась сеть белок-белковых взаимодействий (PPI) и сеть «компонент-болезнь-ингредиент-мишень» для прогнозирования потенциальных фармакологически активных веществ и ключевых целей для лечения MASH с помощью LGZGG; применялся адсорбционный смола с пористостью для обогащения потенциальных активных веществ, после чего состав компонентов в участке элюирования 50% этанолем LGZGG (LGZGG-50) анализировался с помощью UPLC-Q-TOF-MS/MS. Модель MASH у мышей была создана с помощью 12-недельного кормления высокожировым, высокохолестеринным и высоким фруктозным рационом, мыши случайным образом были разделены на нормальную группу, модельную группу, группу с положительным контролем (MGL-3196, 1 мг/кг), группу LGZGG (по сырому лекарственному веществу, 34 г/кг/день) и группу LGZGG-50 (по сырому лекарственному веществу, 34 г/кг/день). Эффективность лечения MASH in vivo оценивалась по уровням аспартатаминотрансферазы (AST), аланинаминотрансферазы (ALT), общего холестерина (TC), триглицеридов (TG), холестерина липопротеинов низкой плотности (LDL-C) и высокой плотности (HDL-C) в сыворотке крови, а также патоморфологическим изменениям печени, наблюдаемым с использованием гематоксилина и эозина (HE) и окрашивания Sirius red. С помощью вестерн-блоттинга определялись уровни экспрессии белков протеинкиназы, активируемой аденозинмонофосфатом (AMPK), фосфорилированного AMPK (p-AMPK), связаного с сиртуином 1 (SIRT1), ядерного рецептора активируемых пролифератором пероксисом α (PPARα) и карнитинпальмитоилтрансферазы 1A (CPT1A) в ткани печени для верификации регуляторной роли ключевых мишеней. Из LGZGG было идентифицировано 83 химических компонента, включая 20 флавоноидов, 13 терпенов, 17 органических кислот, 7 аминокислот, 11 гликозидов, по 3 нуклеозида, ароматических соединений и алкалоидов, 2 фенилпропаноидов и сахаров, и по одному нуклеиновой кислоте и стероидам. Анализ сетевых мишеней выявил 134 общих цели, ключевые из которых включают SIRT1, PPARα, NF-κB1 и IL-6. Обогащение по KEGG вовлекало в основном сигнальные пути AMPK и PPAR. Топологический анализ сети «компонент-болезнь-ингредиент-мишень» показал, что потенциальные фармакологически активные вещества LGZGG против MASH — это флавоноиды и терпены. В составе LGZGG-50 относительно содержание флавоноидов и терпенов в режимах положительных ионов составляло 74,00% и 62,41% соответственно, что свидетельствует об эффективном обогащении общих флавоноидов и терпенов. Результаты in vivo показали, что по сравнению с модельной группой обе группы LGZGG и LGZGG-50 значительно снизили массу тела мышей с MASH, массу печени, серумные уровни TG, GLU, ALT (P < 0.05), при этом LGZGG значительно увеличивал уровень HDL-C (P < 0.01), обе группы улучшили патологическое повреждение ткани печени; данные western blot показывали значительное увеличение экспрессии p-AMPK/AMPK, SIRT1, PPARα, CPT1A в группе LGZGG (P < 0.05, P < 0.01) и значительное повышение p-AMPK/AMPK и CPT1A в группе LGZGG-50 (P < 0.01). Вывод: LGZGG сильно улучшает MASH, основные фармакологические вещества, вероятно, — флавоноиды и терпены, механизм действия может быть связан с регуляцией сигнального пути AMPK/SIRT1/PPARα, улучшением липидного обмена печени и патологического повреждения.

гранулы Линггуй Шугань;химические компоненты;идентификация;метаболический ассоциированный стеатогепатит;ультравысокоэффективная жидкостная хроматография с квадруполем и временем пролёта (UPLC-Q-TOF-MS/MS)