Цель исследования основана на теории традиционной китайской медицины "ян-оживление, инь-формирование" и изучает молекулярные механизмы противопростато́чного рака (PCa), стимулируемые препаратом Гуйчжи Фулинъюань с добавками (GZFLJWF), через путь сигнализации miR-34a-5p/δ-подобный лиганд 1 (DLL1)/гомолог гена выреза края крыльев дрозофилы (Notch). Методология включала использование теста на пролиферацию и активность клеток CCK-8 для определения оптимальных условий интервенции сывороткой с лекарственными средствами GZFLJWF и доксетакселем (DXT). Клетки человеческого рака предстательной железы (PC-3) были разделены на контрольную группу, группу GZFLJWF (10%) и группу DXT (30 нмоль/л). Влияние лекарственной сыворотки GZFLJWF на миграцию и пролиферацию клеток PC-3 оценивалось с помощью теста царапины и колониеобразования, апоптоз клеток определялся методом TUNEL. Трансмиссия имитаторов miR-34a-5p и ингибиторов miR-34a-5p проводилась, экспрессия miR-34a-5p, DLL1, Notch1 и их эффекторных факторов NICD1, Hes1, Hey1 на уровне мРНК количественно оценивалась с помощью количественной ПЦР в реальном времени, а белковый уровень DLL1, Notch1, NICD1, Hes1, Hey1 оценивался с помощью автоматической системы WES для изучения влияния miR-34a-5p на путь DLL1-опосредованного Notch. Дальнейшее вмешательство сывороткой GZFLJWF оценивалось через иммунную флуоресценцию (IF) для белков DLL1, Notch1, выражение мРНК и белков связанных с путем miR-34a-5p/DLL1/Notch с помощью Real-time PCR и WES соответственно для изучения регуляторного эффекта GZFLJWF на путь. Результаты показали, что лекарственная сыворотка GZFLJWF значительно ингибирует жизнеспособность, миграцию и пролиферацию клеток PC-3 и способствует их апоптозу (P<0,01). Механизм показал, что сверхэкспрессия miR-34a-5p значительно снижает экспрессию ключевых молекул пути DLL1/Notch на уровне мРНК и белков, а также усиливает апоптоз клеток (P<0,01), в то время как ингибирование miR-34a-5p оказывает противоположный эффект. Лекарственная сыворотка GZFLJWF может обратить активацию пути DLL1/Notch и подавление апоптоза, вызванные ингибированием miR-34a-5p, повышая экспрессию miR-34a-5p и значительно снижая экспрессию связанных молекул (P<0,01). Заключение: GZFLJWF обладает противораковыми свойствами против рака предстательной железы, вероятно, за счет повышения экспрессии miR-34a-5p, что приводит к подавлению пути DLL1/Notch и стимулированию апоптоза раковых клеток предстательной железы. Настоящее исследование предоставляет экспериментальные доказательства молекулярного механизма действия данного препарата.

Гуйчжи Фулинъюань с добавками;рак предстательной железы;miR-34a-5p;miR-34a-5p/δ-подобный лиганд 1 (DLL1)/гомолог гена выреза края крыльев дрозофилы (Notch) путь сигнала;апоптоз