Целью исследования было совместное использование сетевой фармакологии, нетаргетного метаболомического анализа и животных моделей для изучения стабилизирующего эффекта препарата Хуоксин Вань на уязвимые бляшки при атеросклерозе (AS) и молекулярных механизмов действия. Методика: было использовано 40 самцов мышей SPF класса с генетическим дефицитом аполипопротеина E (ApoE^-/-), которым на протяжении 12 недель вводился высокожировой рацион для создания модели AS. Мыши были случайным образом разделены на группы: модельная, группа аторвастатина (2.5 мг·кг^-1·д^-1), группа низкой дозы Хуоксин Вань (18.2 мг·кг^-1·д^-1), группа высокой дозы Хуоксин Вань (36.4 мг·кг^-1·д^-1), по 10 животных в каждой группе, а также 10 мышей C57BL/6J в качестве контрольной нормальной группы. Модельная и нормальная группы получали по 1 доза равным по объему физиологического раствора ежедневно внутригрудно, а другие группы — соответствующие дозы препаратов по тому же способу. После 8 недель лечения проводились ультразвуковые измерения разницы диаметра сосудов аорты и сонной артерии (Dd-Ds) и скорости пульсовой волны (PWV); биохимические анализы на общий холестерин (TC), триглицериды (TG), ЛПНП (LDL-C), ЛПВП (HDL-C); иммуноферментный анализ (ELISA) уровней IL-6, IL-1β и фактора некроза опухоли (TNF-α) в сыворотке мышей; оценивались площадь бляшки корня аорты, липиды, коллаген, макрофаги (CD68) и экспрессия α-гладкомышечного актина (α-SMA) с помощью гематоксилина-эозина (HE), красителя Oil Red O, окрашивания по Масону и иммуноцитохимии, а также вычислялся индекс уязвимости бляшки (VI). Кроме того, проводилось окрашивание печени Oil Red O для изучения липидных отложений и измерялось содержание холестерина печени. На основе сетевой фармакологии был проведен прогноз основных целевых белков препарата-заболевания; с помощью нетаргетного метаболомического анализа определялись ключевые дифференциальные метаболиты и связанные пути; с помощью Western blot и Real-time PCR анализировалась экспрессия PPARγ, LXRα, фосфорилированного p65 NF-κB (p-NF-κB p65), NF-κB p65, ABCA1, ABCG1 и белка IL-6 и мРНК в тканях печени мышей. Результаты: in vivo показали, что препарат Huoxin Wan снижает значение PWV в дуге аорты мышей ApoE^-/- (P<0.05), увеличивает величину Dd-Ds аорты (P<0.05), значительно улучшает эластичность сосудов и снижает жесткость артерий; уменьшает площадь липидных бляшек в дуге аорты (P<0.01) и депозицию липидов в печени (P<0.01); снижает содержание липидов и инфильтрацию макрофагов в бляшках (P<0.05); повышает отложение коллагена и количество гладкомышечных клеток (P<0.05), уменьшает индекс уязвимости бляшки (VI) (P<0.01) и регулирует уровень липидов в крови (P<0.05). Объединенный метаболомический и сетевой фармакологический анализ показали, что Huoxin Wan активирует ядерный рецептор PPARγ, повышая экспрессию сигнального пути PPARγ/LXRα/ABCA1/ABCG1, способствуя выведению холестерина из макрофагов и подавляя воспалительное выражение NF-κB/IL-6, что обеспечивает стабилизацию уязвимых бляшек AS. Результаты Western blot и Real-time PCR показали повышение белков и мРНК PPARγ, LXRα, ABCA1 и ABCG1 в печени мышей ApoE^-/- (P<0.05) и снижение экспрессии NF-κB и IL-6 (P<0.05). Заключение: Huoxin Wan, вероятно, стабилизирует уязвимые бляшки атеросклероза за счет регулирования сигнального пути PPARγ/LXRα/ABCA1/ABCG1 и подавления воспаления, уменьшая липидные отложения и инфильтрацию макрофагов в бляшках.

атеросклероз; Huoxin Wan; уязвимые бляшки; метаболомика; сетевая фармакология; рецептор активируемый пролифератором пероксисом γ/печеночный X-рецептор α/транспортёр ABC A1/транспортёр ABC G1 (PPARγ/LXRα/ABCA1/ABCG1) сигнальный путь