Целью данного исследования было использование метаболомики для изучения механизма действия формулы для очищения печени, укрепления селезёнки и активизации крови против печёночного фиброза у мышей. Модель печёночного фиброза у мышей была создана путём внутрибрюшинного введения 2,5 мл/кг 20% четырёххлористого углерода (CCl₄, разбавленного оливковым маслом в соотношении 4∶1) в течение 4 недель. 54 мыши C57BL/6J были случайным образом разделены на контрольную группу, модельную группу, группу высокой дозы формулы для очищения печени, укрепления селезёнки и активизации крови (47.32 г/кг), группу средней дозы (23.66 г/кг), группу низкой дозы (11.83 г/кг) и группу, получающую пилюли с панцирем черепахи (1.365 г/кг), по 9 животных в каждой группе. Все группы получали соответствующие дозы ежедневно в течение 4 недель. Через 4 недели были взяты ткани печени и кровь для оценки функции печени и патологического анализа. Метаболиты печени исследовали с помощью ненаправленного метаболомного анализа, включая метод главных компонент (PCA), частичные наименьшие квадраты с дискриминантным анализом (PLS-DA) и ортогональный PLS-DA (OPLS-DA), для изучения метаболитов печени и участвующих метаболических путей в контрольной, модельной и группе высокой дозы, а также провели верификацию методом вестерн-блоттинга на клеточном и животном уровнях. По сравнению с контролем в модельной группе уровни аланиновой (ALT) и аспартатовой (AST) аминокислотных трансфераз были значительно повышены (P<0.0), наблюдалось увеличение воспалительных клеток, формирование фиброзных перегородок, с преобладанием сигнального пути фактора транскрипции FoxO. По сравнению с модельной группой в группе высокой дозы формулы уровни ALT и AST значительно уменьшились (P<0.01), воспалительные клетки снизились, фиброзные перегородки сузились, коллагеновые волокна уменьшились, а площадь коллагена значительно сократилась. Была выявлена 79 различающихся метаболитов, из которых 49 были повышены, а 30 понижены, в основном связанные с циклом трикарбоновых кислот (TCA) и метаболизмом пирувата. Результаты вестерн-блоттинга показали, что по сравнению с контролем в модельной группе экспрессия белков α-SMA, LDHA, FoxO1, PKM2, HK2 и PFK1 в печени была значительно повышена (P<0.05, P<0.01). Концентрация глюкозы в печёночных звездчатых клетках увеличилась, а экспрессия α-SMA, LDHA, FoxO1, PKM2, GLUT1 и PFK1 также была значительно повышена (P<0.05, P<0.01). По сравнению с модельной группой в группе высокой дозы формулы уровни экспрессии этих белков существенно снизились (P<0.05, P<0.01), а концентрация глюкозы в печёночных звездчатых клетках уменьшилась. Вывод: формула для очищения печени, укрепления селезёнки и активизации крови может замедлить патологическое прогрессирование печёночного фиброза у мышей, возможно, посредством регуляции FoxO1, влияющей на цикл TCA и метаболизм пирувата, а также перепрограммирования гликолиза в печёночных звездчатых клетках для способствования регенерации ткани печени.

Формула очистки печени и укрепления селезёнки;Печёночный фиброз;Метаболомика;Печёночные звездчатые клетки;Гликолиз