Механизм действия гранул Qi Qiao Qing Wen Jiedu в снижении повреждений легких у мышей с инфекцией H1N1

JIANG Fuquan ,  

LIU Tonghua ,  

QIN Lingling ,  

WU Lili ,  

LIU Jingfeng ,  

摘要

Целью является изучение защитного действия и молекулярного механизма гранул Ци Цяо Цин Вэнь Цзеду (QQQW) на вирусную пневмонию у мышей, вызванную вирусом гриппа H1N1. Использовали 36 самцов мышей Balb/c, случайно разделенных на контрольную группу, модельную группу, низкую (1,25 г·кг⁻¹), среднюю (2,5 г·кг⁻¹), высокую (5 г·кг⁻¹) дозы QQQW и группу осельтамивира (20 мг·кг⁻¹), по 6 животных в каждой. За исключением контрольной группы, в остальные группы интратно вводили вирус H1N1 в 1,5-кратной дозе LD50 для создания модели пневмонии. Лечение начинали через 2 часа после заражения, по 1 разу в день в течение 7 дней, с последующим измерением показателей через 24 часа после последней дозы. Оценивали повреждение легочной ткани с помощью окрашивания гематоксилин-эозином (HE) и патоморфологической оценки, идентифицировали компоненты в крови LC-MS, прогнозировали основные мишени и пути сетифармакологии, и проводили эксперименты на клетках A549 с использованием теста жизнеспособности CCK-8, анализа апоптоза методом проточной цитометрии и вестерн-блот анализа для подтверждения механизма. По сравнению с контролем, в модельной группе индекс легких и селезенки, оценки повреждений легких, уровни IL-17, IL-6, IL-1β, TNF-α в сыворотке значительно увеличились (P<0,01), а уровни фосфорилированных PI3K/PI3K, p-Akt/Akt, p-GSK3β/GSK3β существенно снизились (P<0,01). В группах QQQW показатели органов, оценки повреждений и уровни провоспалительных факторов значительно снизились (P<0,05), при этом эффект высокой дозы QQQW не отличался от осельтамивира, и наблюдалось значительное повышение соотношения фосфорилированных белков сигнального пути PI3K/Akt/GSK3β (P<0,01). В клеточных опытах 100 мг/л QQQW значительно повысил жизнеспособность клеток A549, снизил апоптоз, повысил фосфорилированные белки (P<0,01), эффект был обратим с помощью ингибитора PI3K LY294002 (P<0,01). Сетевая фармакология показала, что GSK3β является ключевой мишенью QQQW, а PI3K/Akt — основным путем. Вывод: QQQW (1,25~5 г·кг⁻¹) может дозозависимо уменьшать воспаление легких и повреждения, вызванные H1N1, активируя путь PI3K/Akt/GSK3β, при этом высокая доза QQQW (5 г·кг⁻¹) имеет сопоставимый эффект с осельтамивиром (20 мг·кг⁻¹).

关键词

гранулы Qi Qiao Qing Wen Jiedu; вирус гриппа H1N1; сигнальный путь фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K)/протеинкиназы B (Akt)/гликогенсинтазы киназы 3β (GSK3β); повреждение легких; сетевая фармакология

阅读全文