Estudio sobre el efecto de la combinación de la decocción de Artemisia annua y la decocción de Poria cocos en la regulación de la expresión de células T reguladoras (Treg) / células T auxiliares 17 (Th17) en pacientes con insuficiencia hepática aguda grave relacionada con el virus de la hepatitis B (HBV-ACLF) en cultivo in vitro. Métodos de recolección de sangre periférica fresca de pacientes con HBV-ACLF y separación de monocitos, a través de la separación primaria de Treg y células T CD4 ingenuas por el método de bolas magnéticas y la expansión in vitro de células T CD4 ingenuas induciendo su diferenciación en células Th17, preparación de decocción clara (decocción de Artemisia annua), decocción caliente (decocción de Poria cocos) y combinación de decocciones claras y calientes (decocción de Artemisia annua y decocción de Poria cocos, es decir, el tratamiento claro-caliente para eliminar toxinas y reabsorber estasis de calor y estasis sanguínea), así como de plasma sanguíneo blanco (solución salina fisiológica), establecimiento de un grupo de control blanco, un grupo de tratamiento claro (5,04 g·kg^-1), un grupo de tratamiento caliente (6,21 g·kg^-1), un grupo de tratamiento claro-caliente (17,1 g·kg^-1), y tratamiento de las células de cada grupo por el plasma correspondiente. Uso de citometría de flujo para detectar la frecuencia de las células Treg/Th17, de ELISA para detectar el nivel de expresión del factor de crecimiento transformante-β (TGF-β), de la tecnología de captura de bolas de citometría de flujo (CBA) para detectar el nivel de expresión de interleucina (IL)-10, IL-17A, factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), IL-23, de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (PCR) para detectar la expresión de ARNm de la proteína reguladora de la activación transcripcional de Forkhead box P3 (FoxP3) y la proteína reguladora del receptor nuclear de ácido retinoico-γt (ROR-γt, así como de la inmunodetección de la proteína (Western blot) para detectar la expresión de las proteínas FoxP3 y ROR-γt. Después de la intervención de las decocciones claras, calientes y claras-calientes, en comparación con el grupo de control, la frecuencia de las células Treg y Th17 del grupo claro-caliente disminuyó, al igual que la expresión de los factores TGF-β e IL-10 de las células Treg, y de los factores TNF-α, IL-17A, IL-23 de las células Th17 disminuyó de manera significativa, al igual que la expresión de ARNm de FoxP3 y ROR-γt y la expresión de las proteínas (P<0.01) ; en comparación con el grupo claro, la frecuencia de las células Treg, la expresión de ARNm de FoxP3 y de las proteínas disminuyó en el grupo claro-caliente, pero la diferencia no fue estadísticamente significativa, al igual que la frecuencia de las células Th17, y la expresión de los factores TGF-β, IL-10, de las células Treg, al igual que de los factores TNF-α, IL-17A, IL-23 de las células Th17 disminuyó, al igual que la expresión de ARNm de ROR-γt y las proteínas (P<0.05, P<0.01) ; en comparación con el grupo caliente, la frecuencia de las células Treg, la expresión de ARNm de FoxP3 y de las proteínas disminuyó en el grupo claro-caliente, pero la diferencia no fue estadísticamente significativa, al igual que la frecuencia de las células Th17, y la expresión de los factores TGF-β, IL-10, de las células Treg, al igual que de los factores TNF-α, IL-17A, IL-23 de las células Th17 disminuyó, al igual que la expresión de ARNm de ROR-γt y las proteínas (P<0.05). Conclusión : La combinación de decocciones claras y calientes puede regular la expresión específica de las células Treg y Th17, inhibir la activación excesiva de las células Treg y Th17, reducir la secreción de los factores celulares TGF-β, IL-10, TNF-α, IL-17A, IL-23, atenuando así la reacción inflamatoria de la insuficiencia hepática y mejorando el pronóstico de los pacientes.

insuficiencia hepática aguda grave relacionada con el virus de la hepatitis B;células T reguladoras (Treg);células T auxiliares 17 (Th17);reacción inflamatoria;tratamiento claro-caliente