El propósito de este estudio fue explorar el efecto regulador de la decocción combinada de Artemisiae annuae (AA) y herba ephedrae (HE) (método de purificación-método de calentamiento-método combinado) en la expresión de los linfocitos T reguladores (Treg) / linfocitos T auxiliares 17 (Th17) en el cultivo ex vivo de pacientes con insuficiencia hepática aguda a recaída aguda asociada al VHB (VHB-DRAA). Métodos Se recolectaron muestras de sangre periférica fresca de pacientes con VHB-DRAA y se aislaron células mononucleares mediante centrifugación en gradiente de ficol. Se aislaron complejos Treg y linfocitos T CD4 ingenuos mediante inmunomagnetismo. Los linfocitos T CD4 ingenuos se diferenciaron en células Th17 después de la expansión ex vivo, y se prepararon plasmas medicamentosos del método de purificación (decocción de AA), del método de calentamiento (decocción de HE) y del método combinado (decocción combinada de AA y HE, es decir, método de tonificación-eliminación de toxinas-disipación de la estasis) y plasmas de ratas Wistar en ayunas (solución salina), y las células de cada grupo se trataron con el plasma correspondiente. La frecuencia de los linfocitos Treg / Th17 se midió por citometría de flujo, la expresión del factor de crecimiento transformante-β (TGF-β) se midió por ELISA, la expresión de la interleucina (IL)-10, IL-17A, el factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) y IL-23 se midió por CBA, la expresión del ARNm forkhead box P3 (FoxP3) y del receptor nuclear de retinoides-γt (ROR-γt) se midió por reacción en cadena de polimerasa cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) y la expresión de las proteínas FoxP3 y ROR-γt se midió por Western blot. Resultados Después de la intervención con plasmas medicamentosos del método de purificación, del método de calentamiento y del método combinado, en comparación con el grupo de control, las frecuencias de los linfocitos Treg / Th17 del grupo del método combinado disminuyeron, los factores Treg TGF-β, IL-10 y los factores Th17 TNF-α, IL-17A, IL-23 disminuyeron significativamente, la expresión del ARNm y de las proteínas FoxP3, ROR-γt disminuyó significativamente (P < 0,01). En comparación con el grupo del método de purificación, las frecuencias de los linfocitos Treg, el ARNm y las proteínas FoxP3 disminuyeron en el grupo del método combinado, pero las diferencias no fueron estadísticamente significativas, las frecuencias de los linfocitos Th17, los factores Treg TGF-β, IL-10 y los factores Th17 TNF-α, IL-17A, IL-23 disminuyeron, la expresión del ARNm y las proteínas ROR-γt disminuyeron significativamente (P < 0,05, P < 0,01). En comparación con el grupo del método de calentamiento, las frecuencias de los linfocitos Treg, el ARNm y las proteínas FoxP3 disminuyeron en el grupo del método combinado, pero las diferencias no fueron estadísticamente significativas, las frecuencias de los linfocitos Th17, los factores Treg TGF-β, IL-10 y los factores Th17 TNF-α, IL-17A, IL-23 disminuyeron, la expresión del ARNm y las proteínas ROR-γt disminuyeron significativamente (P < 0,05). Conclusión El método combinado puede regular a la baja la expresión específica de los factores de transcripción de los linfocitos Treg / Th17, inhibir la hiperactivación de los linfocitos Treg / Th17, reducir la secreción de los factores Treg TGF-β, IL-10, TNF-α, IL-17A, IL-23, atenuar la reacción inflamatoria de la insuficiencia hepática, y mejorar el pronóstico de los pacientes.

insuficiencia hepática aguda a recaída aguda asociada al VHB;linfocitos T reguladores (Treg);linfocitos T auxiliares 17 (Th17);reacción inflamatoria;método de purificación-método de calentamiento-método combinado