El objetivo del diseño uniforme es determinar la combinación óptima de los componentes monoméricos efectivos (quercetina, caempesterol, ácido de resina de incienso, ácido oleanólico) en la fórmula clásica de ungüento Fù Jǐn Shēng Jī Sǎn para favorecer la cicatrización de úlceras diabéticas (UD) y lograr una aplicación moderna. El método sigue el enfoque 'diseño uniforme - prueba farmacológica - modelado matemático y verificación del modelo', empleando el plan de diseño uniforme U₁₄ (14⁵) con los cuatro componentes monoméricos del medicamento como factores de estudio, la proliferación de células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) inducida por la glucosa como indicador farmacológico, la construcción de un modelo matemático entre los componentes monoméricos efectivos y el indicador farmacológico utilizando el software DPS, y finalmente una verificación de los resultados del diseño uniforme mediante el método de detección de proliferación y actividad celular (CCK-8), la curación de las laceraciones celulares, la formación de tubos, la técnica de inmunotransferencia de proteínas (Western blot) y la reacción de amplificación en cadena por polimerasa en tiempo real (Real-time PCR). De las 14 combinaciones, en comparación con el grupo modelo de alto contenido de glucosa, la diferencia del grupo 6 es estadísticamente significativa y su efecto de proliferación es el más fuerte (P<0,05) ; después de la modelización con el software DPS, finalmente se ajustaron cuatro ecuaciones de regresión polinomial de segundo orden Y₁~Y₄, y teniendo en cuenta el ajuste, la estabilidad del modelo y las necesidades prácticas, las ecuaciones Y₁~Y₃ se utilizan para la verificación posterior ; al mismo tiempo, para garantizar la reproducibilidad de los experimentos, la combinación 6 también se utiliza para la verificación ; y las combinaciones 6, las ecuaciones Y₁~Y₃ se renombraron sucesivamente en nuevas combinaciones ① ~ ④, para aplicar la forma de combinación monomérica del ungüento clásico Fù Jǐn Shēng Jī Sǎn en la medicina moderna. Los resultados de las verificaciones experimentales muestran que los experimentos CCK-8, de curación de laceraciones y de formación de tubos muestran que, en comparación con el grupo de control, la viabilidad celular, la tasa de curación y el número de tubos formados de HUVEC después de la estimulación con 50 mmol·L^-1 de glucosa están significativamente reducidos ; además, los niveles de expresión de los factores de crecimiento vascular VEGF2 y FGF2 y de CD31 también están significativamente reducidos. Después de la intervención con las nuevas combinaciones ① ~ ④, las nuevas combinaciones ① y ③ mejoran significativamente estas funciones biológicas de HUVEC dañadas por 50 mmol·L^-1 de glucosa. Además, a partir de las razones de regresión de las nuevas combinaciones ① y ③ y las dosis relativas de los componentes monoméricos, se deduce que el ácido oleanólico, la quercetina y el ácido de resina de incienso tienen todos un efecto promotor de la neovascularización de HUVEC en un entorno con alto contenido de glucosa y tienen un efecto principal (el coeficiente de correlación parcial es positivo, todos > 0,9) ; el ácido oleanólico y la quercetina, el caempesterol y el ácido de resina de incienso promueven la neovascularización de HUVEC en forma de interacción (el coeficiente de correlación parcial es positivo). En conclusión, las nuevas combinaciones ① y ③ son las mejores combinaciones, que pueden atenuar el efecto inhibitorio de la glucosa alta, estimular la proliferación, la migración y la capacidad de formación de tubos de HUVEC en un entorno con alto contenido de glucosa, promover la expresión del factor de crecimiento vascular endotelial A (VEGFA), la FGF2, el CD31, y así ejercer la capacidad de promoción de la neovascularización de HUVEC, para favorecer la cicatrización de las UD. Este hallazgo no solo confirma que las nuevas combinaciones ① y ③ tienen una buena reproducibilidad y viabilidad, sino que también proporciona una nueva idea y método para construir un modelo matemático razonable para estudiar en profundidad la teoría china de la combinación de medicamentos.

Fujin Shengjisan;diabetic ulcer;angiogenesis;uniform design