El impacto de la intervención PGC-1α/PPARγ con píldoras de guishao y guizhi en la biogénesis de las mitocondrias de las células madre mesenquimales de la médula ósea

YANG Ying ,  

FENG Xiuzhi ,  

CHEN Yiran ,  

WANG Zhimin ,  

GUO Xian ,  

REN Yanling ,  

摘要

El objetivo se basa en la teoría de «el yang transforma el qi, el yin forma» para investigar los mecanismos moleculares por los cuales las píldoras de guishao y guizhi influyen en la biogénesis de las mitocondrias de las células madre mesenquimales de la médula ósea de ratas durante el proceso de diferenciación en adipocitos al activar conjuntamente el coactivador-1α del receptor activado por el proliferador de peroxisoma γ (PGC-1α) y el receptor γ activado por el proliferador de peroxisoma (PPARγ) y para proporcionar más bases teóricas para la prevención y el tratamiento de la osteoporosis postmenopáusica (PMOP) por las píldoras de guishao y guizhi. Las células madre mesenquimales de la médula ósea (BMSCs) se dividen en grupo de inducción en adipocitos (grupo modelo), grupo de píldoras de guishao, grupo de píldoras de guizhi y grupo de placer regulado. La identificación celular se realiza mediante citometría de flujo; la curva de crecimiento de las BMSCs se traza mediante el método de coloración de metiltiazol (MTT) y se prueba el efecto de las píldoras de guishao y guizhi en la proliferación de las BMSCs; la formación de gotas lipídicas se detecta mediante el método de tinción de rojo aceite O; la expresión de proteínas se detecta por inmunotransferencia (Western blot): PPARγ, factor de unión al elemento potenciador CCAAT (C/EBP) α, C/EBPβ, lipasa lipoproteica (LPL), PGC-1α, proteínas relacionadas con la proteína estructural PR (UCP1), proteínas relacionadas con el protector 16 del espacio PR (PRDM16), biogénesis de mitocondrias PGC-1α, factor 1 de replicación nuclear (Nrf1), Nrf2, proteínas TRAF asociadas al factor 2 de regulación mitótica, proteínas de transcripción relacionadas con el ADN mitocondrial A (TFAM); se detecta el ARNm de PPARγ, C/EBPα, C/EBPβ, LPL y el número de copias del gen citocromo B (CytoB) por reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (PCR cuantitativa en tiempo real); se observa la estructura ultramicroscópica de las mitocondrias en el microscopio electrónico de transmisión. En comparación con el grupo modelo, la capacidad de proliferación de las BMSCs en cada grupo de medicamentos aumenta con el tiempo de intervención; las gotas lipídicas disminuyen notablemente después de la intervención con medicamentos; los niveles de expresión del ARNm y las proteínas PPARγ, C/EBPα, C/EBPβ, LPL relacionadas con la inducción de adipocitos se regulan a la baja de manera significativa (P<0,01); los niveles de expresión de proteínas relacionadas con las mitocondrias marrones PGC-1α, UCP1, PRDM16 se regulan significativamente al alza (P<0,01); aumenta el número de mitocondrias, disminuye su inflamación, la membrana doble y la estructura de las crestas son claras, y al mismo tiempo, disminuye la ruptura de las crestas internas; el número de copias del gen CytoB aumenta significativamente (P<0,01); los niveles de expresión de proteínas relacionadas con la biogénesis de las mitocondrias PGC-1α, Nrf1, Nrf2, TFAM se regulan significativamente al alza (P<0,01). Conclusión Las píldoras de guishao y guizhi pueden influir en la biogénesis de las mitocondrias de las BMSCs a través de PGC-1α/PPARγ para prevenir y tratar la PMOP.

关键词

Píldora de guishao; píldora de guizhi; osteoporosis postmenopáusica; coactivador-1α del receptor activado por el proliferador de peroxisoma γ; biogénesis de las mitocondrias

阅读全文