El objetivo de este estudio fue investigar el mecanismo de acción del medicamento chino Xiaoya Shukun Tang (XYSKD) en la formación y liberación de trampas extracelulares de neutrófilos (NETs) a través de la regulación de la vía de señalización de fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K)/proteína cinasa B (Akt)/diana de rapamicina de mamíferos (mTOR), la atenuación de la reacción inflamatoria, la supresión de la proliferación excesiva de fibroblastos en la adhesión pélvica, la reducción del nivel de adherencia y fibrosis, y el mecanismo de acción en la integridad tisular posterior a enfermedades inflamatorias pélvicas (SPID). Métodos: 84 ratas Wistar se asignaron al azar a grupos: grupo vacío, grupo modelo, grupo XYSKD (8 mg/kg), grupo activador de mTOR (10 mg/kg), grupo activador de mTOR+XYSKD (10 mg/kg+8 mg/kg), grupo inhibidor de mTOR (2 mg/kg), grupo inhibidor de mTOR+XYSKD (2 mg/kg+8 mg/kg), un total de 7 grupos. En el grupo modelo se utilizó hambre e infección ascendente por Escherichia coli para crear un modelo de ratas con SPID, y tras 14 días de intervención médica se realizó observación microscópica electrónica de la adherencia pélvica, aspecto macroscópico del útero, las trompas de Falopio y los ovarios, determinación de los niveles de interleucina-1β (IL-1β), interleucina-17 (IL-17), factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) en el lavado peritoneal, detección de mieloperoxidasa en las trompas de Falopio y expresión de histona 3 (H3) por inmunofluorescencia, determinación del nivel relativo de expresión de elastasa neutrófila (NE), molécula de adhesión intercelular-1 (CD54), alfa-actina de músculo liso (α-SMA), y H3, PI3K, Akt por análisis de inmunoensayo enzimático (ELISA) y Western blot, y por reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR en tiempo real) en la adherencia pélvica. Resultados: En comparación con el grupo vacío, en el grupo modelo se observó bajo microscopio electrónico una gran cantidad de colágeno con frecuentes pliegues del citoplasma de los fibroblastos, mitocondrias disminuidas o ausentes y retículo endoplasmático desorganizado con expansión; tras la laparotomía se observó una amplia congestión pélvica, proliferación del tejido conectivo, engrosamiento y endurecimiento de las trompas de Falopio cerca del útero, adherencias de las trompas de Falopio y los ovarios o quistes epiteliales; en el lavado peritoneal, los niveles de IL-1β, IL-17 y TNF-α aumentaron significativamente (P<0.01), la intensidad media de la fluorescencia de MPO y H3 aumentó (P<0.01), la expresión de NE, H3, CD54, PI3K, Akt aumentó significativamente (P<0.01). En comparación con el grupo vacío, en el grupo activador de mTOR bajo microscopio electrónico se observó un aumento significativo en la cantidad de fibroblastos, pliegues frecuentes del citoplasma de los fibroblastos, ausencia de mitocondrias, ampliación del retículo endoplasmático y un aumento significativo del colágeno; Las adherencias pélvicas, el daño a los tejidos del útero, las trompas de Falopio y los ovarios empeoraron; en el lavado peritoneal, los niveles de IL-1β, IL-17 y TNF-α aumentaron significativamente (P<0.01), la intensidad media de la fluorescencia de MPO y H3 aumentó (P<0.01); en los grupos XYSKD e inhibidor de mTOR, la cantidad de fibroblastos y colágeno disminuyó, la ausencia de mitocondrias y la expansión del retículo endoplasmático mejoraron en diferentes grados; el aspecto macroscópico del útero, las trompas de Falopio y los ovarios mejoró en diferentes grados; en el lavado peritoneal, los niveles de IL-1β, IL-17 y TNF-α disminuyeron significativamente (P<0.01), la intensidad media de la fluorescencia de MPO y H3 disminuyó (P<0.01), la expresión de NE, H3, CD54, PI3K, Akt disminuyó significativamente (P<0.05, P<0.01). En comparación con el grupo activador de mTOR, en el grupo activador de mTOR+XYSKD hubo una mejoría en la estructura patológica del tejido pélvico, una disminución en los niveles de IL-1β, IL-17 y TNF-α (P<0.01), una disminución en la intensidad media de la fluorescencia de MPO y H3 (P<0.01), una disminución significativa en la expresión de NE, H3, CD54, α-SMA, p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt (P<0.01), una disminución significativa en la expresión de NE, H3, CD54, α-SMA, PI3K, Akt mRNA (P<0.01). En comparación con el grupo inhibidor de mTOR, en el grupo inhibidor de mTOR+XYSKD el grado de patología de los tejidos pélvicos disminuyó, los niveles de IL-1β, IL-17 y TNF-α disminuyeron significativamente (P<0.01), la intensidad media de la fluorescencia de MPO y H3 disminuyó (P<0.01), la expresión de NE, CD54 disminuyó significativamente (P<0.05). Conclusión: el medicamento chino XYSKD es capaz de suprimir la formación excesiva y la liberación de trampas extracelulares de neutrófilos al inhibir PI3K/Akt/mTOR, mejorar el entorno inflamatorio en la pelvis, reducir el grado de adherencias de los tejidos pélvicos, disminuir la proliferación de fibroblastos, ejerciendo así un efecto terapéutico en SPID. Es posible que su mecanismo esté relacionado con la reducción de los niveles de IL-1β, IL-17, TNF-α en la pelvis, la disminución de la expresión de NE, H3, CD54, α-SMA, PI3K, Akt en el tejido adherente de la pelvis.

Xiaoyao Shukun decoction;sequelae of pelvic inflammatory disease;neutrophil extracellular traps;phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin （PI3K/Akt/mTOR） signaling pathway;fibrosis