Exploración del Mecanismo de Huanglian Wendan Tang sobre la Enteritis Diabética de Tipo Húmedo y Caliente en Ratones Basada en la Vía de Señalización TGR5/GLP-1 y la Flora Intestinal

WANG Yujin ,  

QIE Yulong ,  

JIANG Hua ,  

YUAN Chen ,  

DENG Xirui ,  

MENG Xuelian ,  

WANG Wenli ,  

SU Yanjin ,  

摘要

El propósito fue investigar los mecanismos de acción de Huanglian Wendan Tang en el modelo de rata con enteritis diabética de tipo húmedo y caliente, explorando la vía de señalización TGR5/GLP-1 y la microbiota intestinal. Métodos: Setenta y dos ratas macho SD fueron adaptadas durante una semana. Doce de ellas fueron seleccionadas al azar como grupo de control y alimentadas con una dieta normal, y las otras ratas fueron sometidas a un ayuno de 12 horas sin agua, inyecciones intraperitoneales de estreptozotocina (55 mg·kg-1), una dieta rica en azúcar y grasas (solución de sacarosa al 20% + alimentación rica en grasas) y un ambiente húmedo y cálido (caja climática: temperatura de 30 a 34 °C, humedad relativa del 85% al 95%) para inducir un modelo de rata con enteritis diabética de tipo húmedo y caliente. Después de lograr la modelización, las ratas fueron aleatorizadas en grupo modelo, grupo metformina (200 mg·kg-1), grupo Huanglian Wendan Tang en dosis baja, media y alta (7,10; 14,20; 28,39 g·kg-1), cada grupo con 12 ratas. Los grupos de control y modelo fueron tratados con gavetas de solución salina fisiológica una vez al día durante 6 semanas. Durante el período de observación, se midieron el peso corporal y los niveles de glucosa de las ratas cada semana. Después de la administración, se recogieron heces frescas de las ratas y se utilizó la tecnología de secuenciación de ARNr 16S para estudiar las diferencias y cambios en la microbiota intestinal entre los grupos. Se analizaron los niveles de factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) y de interleucina-6 (IL-6) en el suero de las ratas mediante ELISA. Se observaron cambios morfológicos en la mucosa colónica. La expresión de TGR5 y GLP-1 en la mucosa colónica de las ratas se examinó mediante inmunohistoquímica, y la expresión de TGR5 y GLP-1 se detectó mediante la técnica de Western blot en la mucosa colónica de las ratas. Resultados: comparadas con el grupo de control, las ratas del grupo modelo presentaron pérdida de peso, hiperglucemia y síntomas de humedad y calor. Los niveles séricos de IL-6 y TNF-α aumentaron significativamente (P<0,01) en el grupo modelo; la expresión de TGR5 y GLP-1 disminuyó (P<0,01) y la cantidad de bacterias patógenas aumentó. Comparadas con el grupo modelo, las ratas de los grupos de tratamiento mostraron una mejora en el peso corporal, los niveles de glucosa y los síntomas de humedad y calor, siendo el efecto más significativo observado en el grupo de dosis alta de Huanglian Wendan Tang, con una disminución significativa del nivel de inflamación (P<0,01), un aumento significativo en la expresión de TGR5 y GLP-1 (P<0,01) y mejoras significativas en las muestras de mucosa colónica. La tecnología de secuenciación de ARNr 16S reveló un aumento significativo de las bacterias beneficiosas en los grupos de tratamiento. Conclusión: la fórmula Huanglian Wendan Tang puede mejorar eficazmente los síntomas de humedad y calor y los niveles de glucosa en sangre en ratas con enteritis diabética de tipo húmedo y caliente, y su mecanismo de acción probablemente esté relacionado con la regulación de la vía de señalización TGR5/GLP-1 y los trastornos del microbioma intestinal.

关键词

enteritis diabética; flora intestinal; vía de señalización del receptor de ácidos biliares acoplados a proteínas G 5/péptido similar al glucagón-1 (TGR5/GLP-1); Huanglian Wendan Tang

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