Regulación de las cápsulas de descompresión y purificación para mejorar la inflamación pulmonar en ratones infectados con el virus humano de la corona 229E a través de la vía de señalización TLR4/TRIF/TBK1

BAO Lei ,  

GENG Zihan ,  

CUI Xiaolan ,  

摘要

El objetivo del estudio es investigar el efecto antiinflamatorio y la regulación inmunológica de las cápsulas de descompresión y purificación en un modelo de ratones infectados con el virus corona humano 229E (HCoV-229E). 48 ratones BALB/c fueron aleatoriamente divididos en grupo normal, grupo modelo, grupo positivo de cloroquina y grupos de dosis alta, media y baja de las cápsulas de descompresión y purificación, cada grupo con 8 ratones. Para establecer el modelo de infección viral de corona, se utilizó la instilación nasal de líquido viral HCoV-229E. El cuarto día después de la infección, los ratones fueron sacrificados por decapitación en el cuello, y los cambios patológicos de los pulmones fueron evaluados mediante la medición de la masa húmeda de los pulmones y el cálculo del índice pulmonar. Además, se utilizaron la PCR en tiempo real y la técnica de inmunotransferencia (Western blot) para medir los niveles de expresión del ARNm y las proteínas de genes clave en el tejido pulmonar, como el receptor tipo toll 4 (TLR4), TRIF (el adaptador del dominio de estructura tipo toll/interferón-β (TRIF), la quinasa asociada a TANK 1 (TBK1), la proteína de TBK1 (p-TBK1), el regulador del interferón 3 (IRF3) y el regulador fosforilado del interferón 3 (p-IRF3). En comparación con el grupo normal, el índice pulmonar de los ratones en el grupo modelo aumentó significativamente (P<0.01), con una exudación inflamatoria importante en el intersticio pulmonar y un aumento significativo de la expresión de las proteínas TLR4, TRIF, TRAF6, TBK1, p-TBK1, IRF3 y p-IRF3 (P<0.01), lo que indica que el HCoV-229E causó una inflamación pulmonar grave. En comparación con el grupo modelo, los grupos de dosis alta y media de las cápsulas de descompresión y purificación redujeron significativamente el índice pulmonar de los ratones (P<0.01), con tasas de supresión del índice pulmonar del 78,18% y 79,27%, respectivamente. Al mismo tiempo, los resultados de la PCR en tiempo real y Western blot mostraron que el grupo de dosis media de las cápsulas de descompresión y purificación redujo significativamente los niveles de expresión génica y proteínas de TLR4, TRIF, TRAF6, TBK1, p-TBK1 y p-IRF3 (P<0.05). Conclusión: Las cápsulas de descompresión y purificación pueden aliviar la inflamación pulmonar y el daño tisular causado por la infección por coronavirus al inhibir la activación excesiva de la vía de señalización TLR4/TRIF/TBK1.

关键词

cápsulas de descompresión y purificación; coronavirus; TLR4/TRIF/TBK1 (adaptador de dominio de estructura receptor similar al toll/interferón-β/quinasa asociada a TANK 1); regulación inmunológica; coronavirus humano de la corona 229E (HCoV-229E)

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