Feiyanning Inhibits Invasion and Metastasis of Non-small Cell Lung Cancer by Regulating EMT via TGF-β1/Smad Signaling Pathway

FU Xiaojie ,  

YANG Jia ,  

LIU Kaile ,  

WANG Wenjie ,  

XU Zhenye ,  

WANG Zhongqi ,  

DENG Haibin ,  

摘要

El objetivo del estudio fue explorar el mecanismo de acción de la fórmula de Yanining en la inhibición de la transformación epitelial-mesenquimal (EMT) y la migración metastásica de las células del carcinoma de pulmón no microcítico (NSCLC). Métodos: Se utilizó el método de detección de proliferación y actividad celular (CCK-8) para estudiar el efecto de la pulmonar Yanining sobre la proliferación de las células A549 y H1299, ensayos de rasgado y de Transwell para estudiar el efecto de la pulmonar Yanining sobre la migración de las células A549 y H1299, y el método de inmunotransferencia (Western blot) para estudiar el efecto de la pulmonar Yanining sobre la EMT y las proteínas de la vía de señalización del factor de crecimiento transformante-β1 (TGF-β1) / Smad; la adición de TGF-β1 exógeno indujo la EMT en las células A549 y H1299, ensayos de rasgado, de Transwell y de Western blot para estudiar el efecto de la pulmonar Yanining sobre la migración, la EMT y las proteínas de la vía de señalización del factor de crecimiento transformante-β1 (TGF-β1) / Smad después de la inducción de TGF-β1; Los experimentos in vivo se llevaron a cabo en ratones desnudos por inyección venosa de A549, 28 ratones machos SPF se dividieron al azar en 4 grupos: grupo de control, grupo de baja dosis de pulmonar Yanining (FYN1), grupo de alta dosis de pulmonar Yanining (FYN2), grupo de inhibidor de la cinasa tirosina TGF-β (SB431542), y se realizó una intervención correspondiente; después de 40 d de observaciones para los ratones, se realizaron la eutanasia, el análisis de la situación de los focos metastásicos pulmonares, mediante inmunohistoquímica (IHC), estudiando el efecto de la pulmonar Yanining sobre la expresión de las proteínas E-cadherina (E-caderina), N-caderina (N-caderina), fosforilación (p) - Smad2, p-Smad3. Resultados: Después de la intervención de Yanining, en comparación con el grupo de control, Yanining inhibió la proliferación de las células A549 y H1299 dependiendo de la concentración (p <0.01); en comparación con el grupo de control, la capacidad de migración de las células con Yanining disminuyó significativamente (p <0.01); en comparación con el grupo vacío, la expresión de las proteínas marcadoras de EMT N-caderina, los factores de transcripción de dedo de zinc (Zeb1, Snail, Slug) disminuyó notablemente (p <0.05, p <0.01), las proteínas clave de la vía de señalización TGF-β1 / Smad p-Smad2/3, Smad2/3, TβRI, TβRII disminuyeron notablemente (p <0.01); en el modelo de inducción de EMT TGF-β1, en comparación con el grupo TGF-β1, la capacidad de migración de las células Yanining disminuyó significativamente (p <0.01), N-caderina, Zeb1,Snail, proteínas clave de la vía p-Smad2/3, Smad2/3, TβRI, TβRII disminuyeron notablemente (p <0.01). Los estudios in vivo mostraron que en comparación con el grupo de control, el número de focos metastásicos pulmonares en los grupos FYN1, FYN2 y SB431542 disminuyó (p <0.01), la zona de infiltración celular disminuyó, IHC mostró que en comparación con el grupo de control, la expresión del N-caderina aumentó (p <0.01), la expresión N-caderina disminuyó (p <0.05, p <0.01), p-Smad2, p-Smad3 de las proteínas clave de la vía de señalización TGF-β1 / Smad disminuyeron notablemente (p <0.01). Conclusiones: Yanining inhibe la migración y las metástasis de las células NSCLC, su mecanismo está relacionado con la inhibición de la activación de la vía de señalización TGF-β1 / Smad.

关键词

Feiyanning;transforming growth factor-β1 (TGF-β1)/Smad signaling pathway;epithelial-mesenchymal transition (EMT);non-small cell lung cancer (NSCLC);cancer metastasis

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