El objetivo del estudio es estudiar el efecto de la decocción Yulin Hukun sobre la autofagia de las células granulosas ováricas en modelos de ratones con función ovárica reducida inducida por la ciclofosfamida a través de la vía de señal fosfatidilinositol-3-cinasa (PI3K) / proteína quinasa B (Akt) / diana de la rapamicina del mamífero (mTOR) y estudiar el mecanismo de eficacia de la decocción Yulin Hukun sobre el desarrollo folicular. Métodos 60 ratones hembra ICR con un ciclo estral normal se dividieron en un grupo vacío de 10 y un grupo de modelado de 50, la administración de ciclofosfamida (60 mg · kg -1 ) durante 5 días seguidos en la cavidad abdominal para modelar completamente. Los ratones modelados se asignaron al azar a un grupo de modelado, un grupo de estradiol (0,26 mg · kg -1 ), dosis altas, medias y bajas de Yulin Hukun (56,42, 28,21, 14,105 g · kg-1), 10 cada uno. En el grupo vacío y en el grupo de modelado, se administró un líquido fisiológico (10 ml · kg -1 ). Intervención diaria, intervención durante 21 días. Observación del estado, ciclo estral, peso corporal e índice ovárico de los ratones en diferentes grupos; método de análisis de inmunoadsorción enzimática (ELISA) reveló los niveles de folículoestimulina (FSH), hormona luteinizante (LH), estrógeno (E 2 ), hormona antimülleriana (AMH); Hematoxilina-eosina (HE) observación de tinción de patología ovárica; immunoblotting reveló la expresión de las proteínas PI3K, Akt, mTOR, las proteínas relacionadas con la autofagia 7 (Atg7), una proteína relacionada con la autofagia 6 homóloga, una cadena ligera 3№ (LC3№), una proteína de unión a la ubiquitina (p62), una proteína de horquilla O1 (FoxO1), una proteína de horquilla acetilada O1 (Ac-FoxO1) en los ovarios de ratones; PCR en tiempo real utilizando un análisis cuantitativo de fluorescencia en tiempo real (PCR en tiempo real) detectó la expresión de ARNm PI3K, Akt, mTOR, Atg7, Beclin1, LC3№ en los tejidos ováricos de ratones. En comparación con el grupo vacío, los ratones del grupo de modelado sufren trastornos del ciclo estral, disminución del peso corporal de los ratones ( P <0,05); en secciones patológicas, se observa una estructura ovárica suelta con un aumento en el número de folículos bloqueados; el nivel sérico de FSH está aumentado ( P <0,05), los niveles de AMH, E 2 se reducen ( P <0,05); en comparación con el grupo de modelado, los ratones de los grupos de tratamiento recuperan progresivamente su ciclo estral; los ratones del grupo de estrógenos y las dosis altas y medias de Yulin Hukun tienen niveles séricos de FSH reducidos ( P <0,05), niveles de recuperación de AMH ( P <0,05); proteínas Atg7, LC3№, Beclin1, FoxO1, Ac-FoxO1 en los tejidos ováricos
关键词
diminished ovarian reserve;autophagy;phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt)/mammalian target of rapamycin (mTOR) signaling pathway;Yulin Hukun decoction