El efecto de la decocción Buyang Huanwu Tang en la regulación de la homeostasis mitocondrial en las células epiteliales tubulares renales de ratones db/db a través de la vía JAK2/STAT3

LOU Feifei ,  

ZHANG Xueqin ,  

TIAN Xiaochao ,  

WANG Yuehua ,  

CHEN Zhiqiang ,  

摘要

El objetivo de este estudio fue observar el efecto de la decocción Buyang Huanwu Tang en la regulación de la homeostasis mitocondrial en las células epiteliales tubulares renales de ratones db/db con diabetes espontánea a través de la vía de señalización Janus quinasa 2 (JAK2) / factor de transcripción 3 (STAT3). Métodos 30 ratones db/db se dividieron al azar en 3 grupos (10 por grupo), a saber, el grupo de modelo, el grupo de Buyang Huanwu Tang (21,47 g · kg^-1) y el grupo de Engluléjit (10 mg · kg^-1) ; al mismo tiempo, los ratones db/m (n=10) se utilizaron como grupo de control. Después de 12 semanas de tratamiento, se midieron la masa renal / masa corporal del ratón (KW/BW), la cantidad de proteína urinaria de 24 horas (24 h UTP), la relación microalbúmina / creatinina urinaria (UACR), la creatinina sérica (SCr), la N-acetil-β-D-glucosaminidasa (NAG), la proteína relacionada con la lipocalina neutrofílica (NGAL), la cistatina C sérica (Cys C) y la molécula de lesión renal 1 (KIM-1) ; se observaron cambios morfológicos en los riñones de los ratones mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE) ; se determinó la expresión de proteínas asociadas (KIM-1, proteínas apoptóticas, factores inflamatorios, proteínas de dinámica mitocondrial y proteínas asociadas a la vía JAK2/STAT3) mediante Western blot e inmunofluorescencia (IF) ; los niveles de superóxido dismutasa (SOD) y malondialdehído (MDA) se midieron mediante ensayo inmunoenzimático (ELISA) ; la expresión de ARNm de JAK2 y STAT3 en los tejidos renales se detectó mediante PCR en tiempo real. Resultados en comparación con el grupo de control, el valor de KW/BW de los ratones del grupo de modelo aumentó significativamente (P<0,05), 24 h UTP y UACR también aumentaron significativamente (P<0,05, P<0,01), el KIM-1 urinario, NAG, NGAL y Cys C también aumentaron significativamente (P<0,01), la tinción con HE mostró un aumento en el volumen de los glomérulos renales, dilatación de los túbulos renales y degeneración vacuolar, los niveles de interleucina-6 sérica (IL-6) y factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) aumentaron significativamente (P<0,01), la expresión de Bax y la caspasa-3 clivada aumentaron significativamente (P<0,01), la expresión de Bcl-2 disminuyó significativamente (P<0,01), la MDA sérica aumentó significativamente (P<0,05), la SOD disminuyó significativamente (P<0,05), la expresión de proteínas asociadas a la dinámica mitocondrial1 (DRP1) y proteína de escisión 1 (FIS1) aumentó significativamente (P<0,01), la proteína fusión OPA1 y MFN2 disminuyó significativamente (P<0,01), la expresión de p-JAK2 y p-STAT3 también aumentó significativamente (P<0,01) ; en comparación con el grupo de modelo, los valores de KW/BW de los ratones de los grupos de Buyang Huanwu Tang y Engluléjit no mostraron diferencias significativas, 24 h UTP, UACR, KIM-1 urinario, NAG, NGAL y Cys C disminuyeron en diferentes grados (P<0,05, P<0,01), la expresión de IL-6, TNF-α, Bax y la caspasa-3 clivada disminuyó significativamente (P<0,01), la expresión de Bcl-2 aumentó significativamente (P<0,01), la MDA disminuyó significativamente (P<0,05, P<0,01), la SOD aumentó significativamente (P<0,01), la expresión de DRP1 y FIS1 disminuyó significativamente (P<0,01), la expresión de OPA1 y MFN2 aumentó significativamente (P<0,05, P<0,01), la expresión de p-JAK2 y p-STAT3 disminuyó significativamente (P<0,01), la PCR en tiempo real mostró una tendencia similar, las lesiones renales de los ratones se atenuaron. Conclusión la decocción Buyang Huanwu Tang puede atenuar las lesiones renales y la apoptosis celular en ratones db/db, y mejorar la inflamación renal y el estrés oxidativo, su mecanismo puede estar relacionado con la inhibición de la activación excesiva de la vía de señalización JAK2/STAT3, manteniendo así la homeostasis mitocondrial.

关键词

Decocción Buyang Huanwu Tang; células epiteliales tubulares renales; mitocondria; Janus quinasa 2 (JAK2) / factor de transcripción 3 (STAT3)

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