El propósito es investigar el efecto y el mecanismo de la sopa de Yanghe (YHT) en el tratamiento de la osteoartritis (OA). Métodos Experimento in vivo: Después de 1 semana de alimentación adaptativa, se dividieron aleatoriamente 30 ratones C57BL/6J en grupo normal, grupo modelo, grupo de dosis baja y alta de YHT (8.3, 16.6 g · kg - 1), grupo celecoxib (18 mg · kg - 1), grupos de 6 ratones cada uno. Excepto por el grupo normal, los demás grupos construyeron un modelo de OA mediante cirugía de destrucción del menisco lateral derecho. Después de la exitosa creación del modelo, los grupos normal y modelo recibieron solución salina normal por vía oral todos los días, y los grupos de tratamiento recibieron el medicamento correspondiente de acuerdo con la dosis durante 4 semanas. Se utilizó tecnología de tomografía computarizada de microtomografía (Micro-CT) para escanear la rodilla derecha de ratones; Se observó la morfología patológica de la sinovial y el cartílago de los ratones mediante tinción de azul alcian (ABH) y hematoxilina-eosina (HE); Se utilizó ELISA para detectar el nivel de interleucina-6 (IL-6), factor de necrosis tumoral-α (TNF-α) y otros factores inflamatorios en el suero de ratones tratados con YHT; Se observó la expresión de proteínas relacionadas con la vía PI3K / Akt / NF- κ B (PI3K / Akt / NF- κ B) mediante inmunohistoquímica. Experimento in vitro: células RAW264.7 se indujeron con lipopolisacáridos (LPS) para establecer un modelo de inflamación de tipo M1, y se agregaron 1%, 3%, 5% de YHT para intervención, recolectaron el líquido sobrenadante de estas células (CM) y lo agregaron al medio de cultivo de condrocitos para intervención. Se utilizó cromatografía líquida de alta eficacia para analizar la composición de YHT; Se utilizó el ensayo CCK-8 para detectar el efecto de YHT en la viabilidad celular; Se utilizó inmunofluorescencia, citometría de flujo para detectar el grado de polarización de las células M1 / M2 de los macrófagos; Se utilizó el kit de ensayo de apoptosis celular Annexin V para detectar el grado de apoptosis de condrocitos; Se utilizó PCR en tiempo real y Western blot para detectar la expresión de ARNm y proteínas relacionadas en RAW264.7 y condrocitos. En comparación con el grupo normal, los parámetros óseos relacionados del grupo modelo de ratones, como el volumen óseo / volumen total (BV / TV), el número de trabéculas óseas (Tb.N) y el grosor de las trabéculas óseas (Tb.Th), disminuyeron significativamente (P <0.01), y el espacio entre las trabéculas óseas (Tb.Sp) aumentó significativamente (P <0.01), los cambios patológicos de la sinovial y el cartílago eran significativos, los niveles de citocinas inflamatorias en suero, IL-6, TNF-α aumentaron significativamente (P <0.01), la viabilidad de condrocitos disminuyó significativamente mientras que la tasa de apoptosis aumentó significativamente (P <0.01), la intensidad media de fluorescencia de CD86 de las células RAW264.7 aumentó significativamente (P <0.01). Los resultados de PCR en tiempo real mostraron que los niveles de ARNm de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), IL-6, IL-1β en RAW264.7 y condrocitos aumentaron significativamente (P <0.05, P <0.01), y los niveles de ARNm de arginasa-1 (Arg-1), IL-10, CD206 disminuyeron significativamente (P <0.01). La detección de Western blot descubrió que los niveles de fosforilación de proteínas de PI3K, Akt, NF-κB en el grupo LPS aumentaron significativamente (P <0.01), la expresión de la metaloproteasa-13 (MMP-13) aumentó y la expresión de colágeno tipo II (Col-2) disminuyó (P <0.05, P <0.01). En comparación con el grupo modelo, todos los grupos de dosis de YHT mejoraron significativamente los parámetros óseos de los ratones (P <0.01), redujeron significativamente el grosor de las células sinoviales y el desgaste en la superficie del cartílago, aliviaron significativamente los niveles de IL-6 y TNF-α en el suero (P <0.01), aumentaron la tasa de supervivencia de los condrocitos y redujeron significativamente la apoptosis de los condrocitos (P <0.01), y redujeron significativamente la polarización de las células RAW264.7 de tipo M1 (P <0.01). Los resultados de PCR en tiempo real mostraron que los niveles de ARNm de iNOS, IL-6, IL-1β en RAW264.7 y condrocitos disminuyeron significativamente (P <0.05, P <0.01), y los niveles de ARNm de Arg-1, IL-10, CD206 aumentaron significativamente (P <0.05, P <0.01). La detección de Western blot descubrió que todos los grupos de dosis de YHT redujeron significativamente los niveles de fosforilación de proteínas de PI3K, Akt, NF-κB (P <0.05, P <0.01), y al mismo tiempo inhibieron la expresión de MMP-13 y aumentaron la expresión de proteínas de Col-2 (P <0.05, P <0.01). Conclusión YHT puede mejorar significativamente la osteoartritis causada por la inflamación de los macrófagos sinoviales. Su vía probablemente esté relacionada con la inhibición de la vía de señalización PI3K / Akt / NF-κB.

Yanghe sopa; osteoartritis; macrófagos; condrocitos; investigación de mecanismos