El propósito de este estudio fue investigar el efecto del suero sanguíneo medicado con la cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì en la expresión de CircRNA_0001543/factor de transcripción nuclear (NF)-κB en células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) y células sinoviales fibroblásticas humanas (FLSs) cocultivadas de pacientes con espondilitis anquilosante (AS). Métodos: Se extrajo sangre venosa de pacientes con AS, se aislaron y extrajeron PBMCs; las FLSs se cocultivaron con PBMCs de pacientes con AS, y después de la cocultivo se recogieron las FLSs para experimentos posteriores. El grupo normal consistió en FLSs normales, el grupo modelo consistió en la cocultivo celular de PBMCs de AS simulando el estado patológico de AS, el grupo de cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì consistió en la adición de suero sanguíneo medicado de la cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì (6.48 g·kg^-1) a la cocultivo. Investigamos el efecto del suero medicado de HQC en la vitalidad de la cocultivo celular, dividiendo el experimento en grupos en blanco, 10% HQC, 20% HQC y 30% HQC. Investigamos el efecto de la concentración óptima de suero medicado HQC en la expresión de citocinas y marcadores de vías celulares en los grupos correspondientes, dividiendo el experimento en el grupo normal, el grupo modelo y el grupo con la concentración óptima de suero medicado HQC. Se verificó el efecto de la transfección del plásmido de interferencia de CircRNA_0001543, dividiendo el experimento en grupos en blanco, grupo si-NC (más agente de transfección), grupo si-circ_0001543-1 (más agente de transfección e interferencia con el plásmido de transfeción circ_0001543-1), grupo si-circ_0001543-2 (más agente de transfección e interferencia con el plásmido de transfeción circ_0001543-2), grupo si-circ_0001543-3 (más agente de transfección e interferencia con el plásmido de transfeción circ_0001543-3). Se verificó el efecto de la sobreexpresión del plásmido de CircRNA_0001543, dividiendo el experimento en el grupo en blanco, grupo OE-NC (más agente de transfección), grupo OE-circ_0001543 (más agente de transfección y sobreexpresión del plásmido de transfeción circ_0001543). Investigamos el efecto de la interferencia/sobreexpresión de CircRNA_0001543 en la expresión de citocinas y marcadores de vías celulares en los grupos correspondientes, dividiendo el experimento en el grupo si-NC, grupo si-CircRNA_0001543, grupo OE-NC, y grupo OECircRNA_0001543. Se utilizó la técnica de ensayo inmunoenzimático (ELISA) para detectar los niveles de interleucina (IL)-1β, IL-10, IL-37 y la expresión del factor de necrosis tumoral-α (TNF-α); se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR) para detectar la expresión de los genes relacionados con CircRNA_0001543, IκBα, NF-κB p65. Resultados: A las 48 horas, el 30% del suero sanguíneo medicado con la cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì inhibió significativamente la proliferación de la cocultivo celular de PBMCs de AS y FLSs, siendo esta la concentración óptima del suero medicado. En comparación con el grupo normal, el grupo modelo mostró un aumento significativo en la expresión de NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α (P<0,01), y una disminución significativa en la expresión de CircRNA_0001543 mRNA, IL-10, IL-37 (P<0,01). En comparación con el grupo modelo, los diferentes grupos de suero sanguíneo medicado de la cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì mostraron una disminución significativa en la expresión de NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α (P<0,05), y un aumento significativo en la expresión de CircRNA_0001543 mRNA, IL-10, IL-37 (P<0,05); siendo el grupo de 30% de suero medicado el que mostró la diferencia más significativa (P<0,01). En comparación con el grupo si-NC, el grupo si-CircRNA_0001543-3 mostró una significativa disminución en la expresión de CircRNA_0001543 (P<0,01); en comparación con el grupo OE-NC, el grupo OE-CircRNA_0001543 mostró un aumento significativo en la expresión de CircRNA_0001543 (P<0,01), lo que indica que la transfeción con éxito de los plásmidos si-CircRNA_0001543, OE-CircRNA_0001543. Después de la intervención con la mejor concentración de suero medicado de la cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì, el grupo si-CircRNA_0001543 mostró un aumento significativo en la expresión de NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α (P<0,01), y una disminución significativa en la expresión de IL-10, IL-37 (P<0,01); el grupo OE-CircRNA_0001543 mostró una disminución significativa en la expresión de NF-κB p65 mRNA, IκBα mRNA, IL-1β, TNF-α (P<0,01), y un aumento significativo en la expresión de IL-10, IL-37 (P<0,01). Conclusión: El suero medicado de la cápsula de Huangqin Qīngrè Chúbì, al aumentar la expresión de CircRNA_0001543, regula la vía de NF-κB, inhibe los factores inflamatorios, aumenta la expresión de factores antiinflamatorios y mejora la inflamación inmunológica del AS.

Huangqin Qīngrè Chúbì; espondilitis anquilosante; células mononucleares de sangre periférica; células sinoviales fibroblásticas humanas; CircRNA_0001543/factor de transcripción nuclear-κB