Mecanismo molecular por el cual Astrágalo-Hierba serpiente blanca regula el eje LINC01134-CTCF-p21 para inhibir la proliferación del adenocarcinoma pulmonar

SUN Haipeng ,  

ZHUANG He ,  

LIU Xue ,  

LIU Siyuan ,  

摘要

El objetivo es investigar cómo el ARN no codificante LINC01134, que compite por unirse al factor de unión CCCTC (CTCF), afecta al inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (p21) y su impacto en la proliferación de células A549, para estudiar el posible mecanismo por el cual Astrágalo-Hierba serpiente blanca regula este eje para inhibir la proliferación de A549. Métodos: precipitación inmunológica de proteínas que se unen a ARN (RIP) para estudiar la interacción entre LINC01134 y CTCF; precipitación de cromatina inmunoprecipitada (ChIP) para analizar el efecto de la sobreexpresión de LINC01134 sobre la interacción CTCF-p21; transfección lentiviral para obtener líneas estables de A549 oe-NC y oe-LINC01134, agregando 10% de suero sanguíneo medicinal de Astrágalo-Hierba serpiente blanca a cada grupo. Se evaluó el efecto de la hierba en la expresión de LINC01134, CTCF y p21 en células A549 mediante PCR en tiempo real y Western blot; se examinaron la proliferación celular y actividad (CCK-8), formación de colonias; se analizó el ciclo celular mediante citometría de flujo; Western blot se usó para evaluar las proteínas del ciclo. Resultados: comparado con IgG, el grupo oe-CTCF mostró una acumulación significativa de LINC01134 (P<0.01); comparado con oe-Vector, el grupo oe-LINC01134 mostró una disminución significativa de la acumulación de p21 unida a CTCF (P<0.01); comparado con el grupo 10% vacío + oe-LINC01134, el grupo 10% Astrágalo-Hierba serpiente blanca + oe-LINC01134 revirtió la expresión de LINC01134 y p21 (P<0.05) sin efecto significativo en CTCF; dicho grupo también revirtió la viabilidad celular a las 72 h (P<0.05), la proliferación maligna (P<0.05), la proporción celular en fases G0/G1 y S (P<0.01); y la expresión de Cyclin D1, CDK4, Cyclin E, CDK2, p-Rb y E2F3 (P<0.01). Conclusión: La hierba Astrágalo-Hierba serpiente blanca regula el eje LINC01134-CTCF-p21 bloqueando la transición G1/S del ciclo celular en A549, acelerando el envejecimiento celular e inhibiendo la proliferación maligna.

关键词

Astrágalo-Hierba serpiente blanca; eje de señalización LINC01134-CTCF-p21; ciclo; envejecimiento; proliferación

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