Mecanismo molecular por el cual Astrágalo-Hierba serpiente blanca regula el eje LINC01134-CTCF-p21 para inhibir la proliferación del adenocarcinoma pulmonar
El objetivo es investigar cómo el ARN no codificante LINC01134, que compite por unirse al factor de unión CCCTC (CTCF), afecta al inhibidor de quinasa dependiente de ciclina (p21) y su impacto en la proliferación de células A549, para estudiar el posible mecanismo por el cual Astrágalo-Hierba serpiente blanca regula este eje para inhibir la proliferación de A549. Métodos: precipitación inmunológica de proteínas que se unen a ARN (RIP) para estudiar la interacción entre LINC01134 y CTCF; precipitación de cromatina inmunoprecipitada (ChIP) para analizar el efecto de la sobreexpresión de LINC01134 sobre la interacción CTCF-p21; transfección lentiviral para obtener líneas estables de A549 oe-NC y oe-LINC01134, agregando 10% de suero sanguíneo medicinal de Astrágalo-Hierba serpiente blanca a cada grupo. Se evaluó el efecto de la hierba en la expresión de LINC01134, CTCF y p21 en células A549 mediante PCR en tiempo real y Western blot; se examinaron la proliferación celular y actividad (CCK-8), formación de colonias; se analizó el ciclo celular mediante citometría de flujo; Western blot se usó para evaluar las proteínas del ciclo. Resultados: comparado con IgG, el grupo oe-CTCF mostró una acumulación significativa de LINC01134 (P<0.01); comparado con oe-Vector, el grupo oe-LINC01134 mostró una disminución significativa de la acumulación de p21 unida a CTCF (P<0.01); comparado con el grupo 10% vacío + oe-LINC01134, el grupo 10% Astrágalo-Hierba serpiente blanca + oe-LINC01134 revirtió la expresión de LINC01134 y p21 (P<0.05) sin efecto significativo en CTCF; dicho grupo también revirtió la viabilidad celular a las 72 h (P<0.05), la proliferación maligna (P<0.05), la proporción celular en fases G0/G1 y S (P<0.01); y la expresión de Cyclin D1, CDK4, Cyclin E, CDK2, p-Rb y E2F3 (P<0.01). Conclusión: La hierba Astrágalo-Hierba serpiente blanca regula el eje LINC01134-CTCF-p21 bloqueando la transición G1/S del ciclo celular en A549, acelerando el envejecimiento celular e inhibiendo la proliferación maligna.
关键词
Astrágalo-Hierba serpiente blanca; eje de señalización LINC01134-CTCF-p21; ciclo; envejecimiento; proliferación