El objetivo de este estudio fue observar el daño en los microvasos ováricos en ratones con síndrome de coagulación en frío y explorar el mecanismo por el cual la fórmula Wenyijing mejora el daño en los microvasos ováricos en ratones con síndrome de coagulación en frío. Métodos: Cincuenta ratas hembra SD de nivel SPF se asignaron aleatoriamente al grupo en blanco, grupo modelo, grupos de dosis baja y alta de Wenyijing (8,1, 16,2 g · kg-1) y grupo de ácido 4-butilbencil. Cada grupo tenía 10 ratas. El modelo de síndrome de coagulación en frío en ratones grandes fue establecido utilizando el método del baño de agua helada. La intervención se realizó durante el modelado, y el tratamiento continuo con la fórmula Wenyijing fue durante 21 días, una vez al día. Se observaron los síntomas del síndrome de coagulación en frío en ratones grandes, se registró el ciclo estral; el método de ensayo inmunoadsorbente ligado a enzimas (ELISA) se utilizó para detectar los niveles de hormonas reproductivas en suero y el contenido de endotelina-1 (ET-1), óxido nítrico (NO), proteína reguladora de trombina (TM) y factor de von Willebrand (vWF) en el tejido ovárico; se midieron el tiempo de protrombina (PT), el tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT), el tiempo de trombina (TT) y el antígeno de fibra (FIB); se utilizó la técnica de imagen de flujo sanguíneo disperso láser para medir la perfusión del flujo sanguíneo en los microvasos ováricos; se realizó tinción con hematoxilina y eosina (HE) para observar la morfología patológica del tejido ovárico; el citometría de flujo se utilizó para detectar la tasa de apoptosis ovárica; se observó la ultraestructura de las células endoteliales de los microvasos ováricos con microscopía electrónica de transmisión; el método de inmunotransferencia de proteínas (Western blot) se utilizó para detectar la expresión de óxido nítrico sintasa (eNOS), fosforilación (p) -eNOS, caspasa-3, linfoma de células B-2 (Bcl-2), proteína Bcl-2 asociada con X (Bax), proteína de choque térmico 78 (GRP78), proteína homóloga de C/EBP (CHOP), quinasa 1 dependiente de inositol 1α (IRE1α), p-IRE1α, quinasa de señalización de apoptosis 1 (ASK1), p-ASK1, proteína quinasa c-jun N-terminal (JNK), y la expresión de proteína Bax, Bcl-2 en células endoteliales de microvasos ováricos se detectó mediante inmunofluorescencia. Resultados: En comparación con el grupo en blanco, los ratones del grupo modelo presentaron síntomas de síndrome de coagulación en frío, ciclo estral prolongado, desorden de hormonas reproductivas, y los resultados patológicos mostraron una disminución en el número de folículos ováricos, y desorganización de células granulosas. La perfusión del flujo sanguíneo en los microvasos ováricos disminuyó significativamente (P <0.01), el PT, APTT, TT disminuyeron (P <0.05, P <0.01), y el contenido de FIB aumentó (P <0.05), la concentración de NO en el tejido ovárico disminuyó, y los niveles de ET-1, vWF y TM aumentaron significativamente (P <0.01) y la tasa de apoptosis de células ováricas aumentó significativamente (P <0.01). p-eNOS / eNOS, Bcl-2 disminuyeron significativamente (P <0.05), y Bax, cleaved-Caspase3 / Caspase3, GRP78, CHOP, p-IRE1α / IRE1α, p-ASK1 / ASK1, p-JNK / JNK aumentaron significativamente (P <0.05, P <0.01). En comparación con el grupo Modelo, después de la intervención con la fórmula Wenyijing, los síntomas del síndrome de coagulación en frío en ratones grandes se aliviaron, el ciclo estral se recuperó gradualmente, la morfología patológica y la ultraestructura celular endotelial se recuperaron. La perfusión del flujo sanguíneo en los microvasos ováricos aumentó significativamente (P <0.05), la concentración de NO en el tejido ovárico aumentó, y los niveles de ET-1, vWF y TM disminuyeron significativamente (P <0.05, P <0.01), p-eNOS / eNOS, Bcl-2 aumentaron significativamente (P <0.05), y Bax, cleaved-Caspase3 / Caspase3, GRP78, CHOP, p-IRE1α / IRE1α, p-ASK1 / ASK1, p-JNK / JNK disminuyeron significativamente (P <0.05, P <0.01). Conclusión: La fórmula Wenyijing puede regular la vía de señalización IRE1α / ASK1 / JNK para suprimir el estrés del retículo endoplásmico y la apoptosis celular, mejorando el daño en los microvasos ováricos en ratones grandes con síndrome de coagulación en frío.

Fórmula Wenyijing; Síndrome de coagulación por frío; Estrés del retículo endoplásmico; Apoptosis celular; Función endotelial microvascular