Exploración de los mecanismos mediante metablómica no dirigida y metablómica dirigida de ácidos grasos de cadena corta para revelar los efectos de la piel fresca blanca en las lesiones intestinales
El propósito de este estudio es integrar la metabolómica no dirigida con la metabolómica dirigida de ácidos grasos de cadena corta (AGCC) para explorar el efecto y el mecanismo de la piel fresca blanca en las lesiones intestinales de las ratas. Los ratones fueron asignados al azar en grupo de control, grupo de alta dosis de piel fresca blanca (8,1 g·kg-1), grupo de dosis media (2,7 g·kg-1), grupo de baja dosis (0,9 g·kg-1). A excepción del grupo de control, los grupos tratados con piel fresca blanca recibieron administración por gavage de diferentes extractos de piel fresca blanca a diferentes dosis, durante 8 semanas consecutivas. La tinción con hematoxilina-eosina (HE) se utilizó para observar los cambios patológicos en los tejidos intestinales, se utilizó la técnica de enzimoinmunoensayo ligado a un marcador (ELISA) para detectar los niveles de citocinas en los tejidos intestinales de las ratas, incluyendo el factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), la interleucina-6 (IL-6), la interleucina-1β (IL-1β), y la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (Real-time PCR) se utilizó para detectar la expresión de ARN mensajero de proteína de unión y cierre-1 (ZO-1), ocludina y claudina-1 en los tejidos intestinales de las ratas, con el fin de estudiar preliminarmente el efecto de la piel fresca blanca en las lesiones intestinales. Posteriormente se realizaron análisis de metabolómica no dirigida y de metabolómica dirigida de AGCC para explorar más detalladamente los mecanismos de las lesiones intestinales causadas por altas dosis de piel fresca blanca. En comparación con el grupo de control, todos los grupos tratados con diferentes dosis de piel fresca blanca mostraron lesiones intestinales de diferentes grados, con niveles más altos de TNF-α, IL-6 e IL-1β en los tejidos intestinales (P<0,01), y niveles más bajos de ZO-1 (P<0,05, P<0,01), ocludina (P<0,01) y claudina-1 (P<0,05) en los niveles de expresión de ARN mensajero, con el efecto tóxico más fuerte observado en el grupo de alta dosis. Los resultados de la metabolómica no dirigida mostraron que después de la intervención, se identificaron 21 metabólitos diferentes en los contenidos intestinales, con un aumento significativo de 14 metabolitos (P<0,05, P<0,01), una disminución significativa de 7 metabolitos (P<0,05, P<0,01), que actuaron conjuntamente en 10 vías metabólicas relacionadas, como el metabolismo de fosfolípidos y la biosíntesis de ácidos biliares primarios. Los resultados cuantitativos de la metabolómica dirigida de AGCC mostraron que la intervención de piel fresca blanca perturbó los niveles de ácido propiónico, ácido butírico, ácido acético, ácido caproico, ácido isobutírico, ácido isovalérico, ácido valérico e ácido isocaproico en las muestras intestinales de las ratas, con un aumento significativo de los niveles de ácido isovalérico, ácido isocaproico y ácido valérico (P<0,01) y una disminución significativa de los niveles de ácido propiónico, ácido butírico y ácido acético (P<0,05, P<0,01) en comparación con el grupo de control. En conclusión, la piel fresca blanca puede provocar lesiones intestinales al regular el metabolismo de fosfolípidos, la biosíntesis de ácidos biliares primarios y vías metabólicas de AGCC.
关键词
Piel fresca blanca; función de barrera intestinal; metablómica no dirigida; metablómica dirigida de ácidos grasos de cadena corta