Mecanismo de acción de la píldora de limpieza cardíaca de buey en la mejora de la lesión de la barrera hematoencefálica en ratones con hemorragia cerebral de tipo de flema y fuego
El propósito de este estudio fue investigar el efecto de la píldora de limpieza cardíaca de buey sobre la mejora de la lesión de la barrera hematoencefálica en ratones con hemorragia cerebral de tipo de flema y fuego y explorar su posible mecanismo. Método. Se alimentaron ratones con heces autólogas al 15% durante 3 días consecutivos para simular el síndrome de flema y fuego espontáneo, y el cuarto día se les realizó una operación de inducción de hemorragia cerebral con colagenasa. Los ratones del modelo se dividieron al azar en 7 grupos: grupo de cirugía simulada (grupo Sham), grupo Sham+medicación (grupo Sham+NHQXW-H), grupo de inducción de hemorragia cerebral con colagenasa (grupo Colagenasa), grupo de hemorragia cerebral de tipo de flema y fuego (grupo Colagenasa+Heces), baja dosis de NHQXW (grupo NHQXW-L, 0.225 g·kg-1), dosis media (grupo NHQXW-M, 0.45 g·kg-1), y alta dosis (grupo NHQXW-H, 0.90 g·kg-1). Después de la administración continua de medicamentos durante 3 días, se llevaron a cabo experimentos para explorar el efecto de NHQXW en el síndrome de flema y fuego mediante la medición del contenido de agua fecal y la tasa de tránsito del carbono en el intestino delgado; se investigó el efecto de NHQXW en la mejora de la hemorragia cerebral de tipo de flema y fuego mediante la medición del área de la hemorragia cerebral, el daño función nerviosa y el contenido de agua en el cerebro; se examinó más el efecto de NHQXW en la mejora de la disfunción de la barrera hematoencefálica inducida por la hemorragia cerebral de tipo de flema y fuego mediante tinción Evinblue, tinción hematoxilina-eosina (HE), inmunofluorescencia (IF) y Western blot (WB) para detectar la expresión de proteína de cierre-5 (Claudina-5), proteína asociada a vesículas de membrana basal (PLVAP), metaloproteinasas de matriz (MMP)-2 y MMP-9, así como la expresión de proteína cinasa B (Akt), proteína quinasa extracelular regulada por señales 1/2 (ERK1/2), señalización y activación transcripcional de proteínas 3 (STAT3) y proteína relacionada con Yes (YAP) y sus proteínas fosforiladas. Resultados. En comparación con el grupo Colagenasa+Heces, la intervención de NHQXW-M y NHQXW-H redujo significativamente el contenido de agua fecal (P<0.05, P<0.01) y la tasa de tránsito de carbono en el intestino delgado (P<0.01), alivió significativamente el daño función nerviosa (P<0.01), redujo el área relativa de hemorragia cerebral (P<0.01) y la fuga de Evinblue (P<0.01) y aumentó la expresión de proteína Claudina-5 (P<0.05, P<0.01) y la intensidad de fluorescencia (P<0.01), redujo la expresión de proteína PLVAP (P<0.01) y la intensidad de fluorescencia (P<0.05, P<0.01), MMP-2 (P<0.05, P<0.01) y MMP-9 (P<0.01), y disminuyó los niveles de expresión de proteína p-Akt (P<0.05), p-ERK1/2 (P<0.05), p-STAT3 (P<0.01) y p-YAP (P<0.05), y la supresión de la fosforilación de STAT3 fue más significativa. Conclusión. NHQXW puede aliviar eficazmente el déficit función nerviosa y la lesión de la barrera hematoencefálica en ratones con hemorragia cerebral de tipo de flema y fuego, y su mecanismo principal podría estar relacionado con la inhibición de la activación de STAT3.
关键词
Píldora de limpieza cardíaca de buey; síndrome de flema y fuego; hemorragia cerebral; barrera hematoencefálica; señalización y activación transcripcional de proteína 3 (STAT3)