Mecanismo de la fórmula Lung Yanning que regula el miR-328 en exosomas y la vía STAT3/c-Fos/NFATc1 para inhibir la invasión y metástasis de células de cáncer de pulmón

JI Junqing ,  

ZHANG Chengcheng ,  

XU Zhenye ,  

WANG Zhongqi ,  

摘要

Objetivo: explorar el mecanismo molecular mediante el cual la fórmula Lung Yanning regula el miR-328 de los exosomas para afectar la invasión y metástasis del cáncer de pulmón. Métodos: se utilizaron células de cáncer de pulmón con baja y alta capacidad metastásica 95C y 95D, y exosomas aislados como modelos experimentales. Se cultivaron in vitro las células 95C y 95D, se recogió el sobrenadante para aislar los exosomas, que fueron identificados por microscopía electrónica de transmisión (TEM), análisis de seguimiento de nanopartículas (NTA) y Western blot para proteínas; se realizaron experimentos de captación de exosomas para confirmar que las células 95C y 95D podían absorber exosomas del plasma de pacientes con cáncer de pulmón. Se evaluó el efecto inhibidor de la fórmula Lung Yanning (0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.6, 3.2, 6.4 g·L-1) en la proliferación de células 95C y 95D mediante el ensayo CCK-8. Según los resultados, se formaron 3 grupos para experimentos posteriores: grupo control y dos grupos con dosificación de Lung Yanning (1 y 2 g·L-1). Se utilizaron pruebas de cicatrización y Transwell para evaluar la capacidad migratoria e invasiva in vitro de las células 95C y 95D. Se observaron y evaluaron las expresiones proteicas de JAK2, STAT3, c-Fos y NFATc1 mediante Western blot. Los niveles de expresión de ARNm miR-328 se midieron mediante PCR cuantitativa en tiempo real. Resultados: los exosomas del plasma de pacientes con cáncer de pulmón incrementaron la migración, invasión y expresión de miR-328 en células 95C y 95D (P<0.05, P<0.01); la fórmula Lung Yanning inhibió la proliferación, invasión y metástasis de células 95C y 95D de manera dependiente de la dosis (P<0.01), con efectos más significativos en 95C, y redujo la expresión de miR-328 en los exosomas, inhibiendo la expresión de proteínas JAK2, STAT3 y los genes objetivo c-Fos y NFATc1 (P<0.01). Conclusión: la fórmula Lung Yanning puede inhibir la metástasis celular del cáncer de pulmón reduciendo la expresión de miR-328 en exosomas, probablemente a través de la vía de señalización STAT3/c-Fos/NFATc1. Se requieren más estudios para entender el mecanismo y aplicarlo clínicamente, proporcionando ideas terapéuticas de la medicina tradicional china para el tratamiento del cáncer de pulmón.

关键词

Fórmula Lung Yanning; exosomas; miR-328; cáncer de pulmón; invasión y metástasis

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