Exploración del mecanismo de la red de comunicación mediada por miARN derivado de exosomas en la interfaz madre-feto para promover la implantación embrionaria basada en el método de tonificación renal y activación sanguínea

GUO Pei ,  

LIU Jiajun ,  

ZHOU Hang ,  

GUO Zeyi ,  

WANG Yili ,  

DENG Linwen ,  

ZENG Qian ,  

HUANG Jinzhu ,  

摘要

Objetivo Basado en el método de tonificación renal y activación de la circulación sanguínea, explorar si la fórmula de tonificación renal y activación de la circulación afecta la comunicación celular en la interfaz madre-feto mediante la regulación de miARN derivados de exosomas (Exo), mejorando así el trastorno de implantación embrionaria por insuficiencia renal y estasis sanguínea. Método En los animales, excepto el grupo en blanco, se administró hidroxiurea 450 mg·kg-1 por vía oral durante 10 días y adrenalina 0.3 mg·kg-1 durante 7 días consecutivos. Se utilizó mifepristona 5.5 mg·kg-1 para construir un modelo de rata con trastorno de implantación embrionaria por insuficiencia renal y estasis sanguínea. Los grupos de alta, media y baja dosis de la fórmula recibieron 7.30, 3.65 y 1.83 g·kg-1 respectivamente por vía oral, y el grupo de didrogesterona recibió 2.63 mg·kg-1 durante 10 días. Después de la intervención, se observaron cambios patológicos uterinos mediante tinción de hematoxilina-eosina (HE); se detectaron los niveles de expresión de mucina 1 (MUC1), factor de caja forkhead O1 (FoxO1) y proteína homeobox A10 (HoxA10) mediante PCR en tiempo real y Western blot; en experimentos celulares se utilizaron células epiteliales endometriales primarias (EEC) y células trofoblásticas (TC); se preparó suero medicamentoso sin exosomas por ultracentrifugación, se configuró medio completo, se extrajeron Exo del sobrenadante celular para cultivo cruzado; a las 48 h se evaluaron la migración y la invasión mediante ensayo de raspado y método Transwell y se secuenció el miARN Exo derivado de EEC. Resultados Después del modelado, el endometrio de las ratas estaba adelgazado, se redujeron los vasos sanguíneos y las glándulas, disminuyó la cantidad de microvellocidades; la fórmula de tonificación renal y activación sanguínea mejoró la morfología endometrial y aumentó la cantidad de microvellocidades; después del modelado la expresión de MUC1, FoxO1 y HoxA10 disminuyó en todos los grupos (P<0.05), y la fórmula de tonificación renal y activación sanguínea a dosis media y alta aumentó estos niveles (P<0.05); 24 h después de la intervención con suero sin Exo, las tasas de migración e invasión celular en el grupo de la fórmula fueron significativamente mayores (P<0.01); el análisis GO y KEGG del secuenciado Exo derivado de EEC mostró enriquecimiento principalmente en procesos biológicos como la gastrulación, regulación de la diferenciación neuronal, desarrollo y regeneración celular, actuando a través de vías de señalización como MAPK, FoxO1, Wnt, mTOR y TNF. Conclusión La fórmula de tonificación renal y activación sanguínea mejora la receptividad endometrial y promueve la implantación embrionaria mediante la regulación del miARN derivado de exosomas, proporcionando un objetivo potencial para el desarrollo de estrategias terapéuticas de reproducción asistida basadas en miARN exosomal y una nueva base teórica para el tratamiento de la infertilidad con medicina tradicional china.

关键词

Fórmula de tonificación renal y activación sanguínea; Exosomas; Secuenciación de miARN; Interfaz madre-feto

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