Se trata de un estudio cuyo objetivo es explorar la regulación del metabolismo del ácido succínico, la modificación de la succinilación y la inhibición de las células cancerosas del hígado mediante la fórmula XYXT (XYXT) y su mecanismo de acción. Método: preparación de suero sanguíneo medicamentoso XYXT; uso de la prueba de actividad de proliferación celular (CCK-8) para observar el efecto de diferentes concentraciones de ácido succínico sobre la proliferación de las células HepG2, MHCC97H y determinar la concentración de experimentos ulteriores; uso del método CCK-8 para detectar el efecto del suero sanguíneo medicamentoso XYXT (5%, 10%, 15%) sobre la proliferación de las células HepG2, MHCC97H; citometría de flujo, prueba de rasguño celular y prueba Transwell para detectar el efecto del suero sanguíneo medicamentoso XYXT al 10% sobre el ciclo celular, la migración, la invasión y la apoptosis de las células HepG2, MHCC97H; cambios en el metabolismo del ácido succínico y la modificación de la succinilación son detectados mediante dosificación del ácido succínico, detección de la actividad de la succinato deshidrogenasa (SDH) e inmunotransferencia proteica (Western blot); la expresión de la proteína 1 asociada al síndrome de Yes (YAP1) y el factor regulador de la información silenciosa 5 (SIRT5) es detectada mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR en tiempo real), Western blot; la unión de los principales componentes de XYXT con las proteínas diana está verificada mediante acoplamiento molecular. En comparación con el grupo de control, 1~2 mmol·L-1 de ácido succínico puede promover significativamente la proliferación de las células HepG2, MHCC97H (P<0.01); en comparación con el grupo de control, el suero sanguíneo medicamentoso XYXT (5%, 10%, 15%) inhibe significativamente la proliferación de las células HepG2, MHCC97H (P<0.05, P<0.01); en comparación con el grupo de control, el suero sanguíneo medicamentoso XYXT al 10% puede bloquear el ciclo celular de las células HepG2, MHCC97H en la fase pre-DNA (G0/G1) (P<0.01), e inhibe significativamente la migración (P<0.01) y la invasión (P<0.05, P<0.01) de las células HepG2, MHCC97H, promueve la apoptosis de las células HepG2, MHCC97H (P<0.01); además, en comparación con el grupo XYXT solo, la tasa de proliferación de las células HepG2, MHCC97H (P<0.05, P<0.01), la migración y la capacidad de invasión (P<0.05, P<0.01) aumentan significativamente y el porcentaje de células en la fase G0/G1 disminuye (P<0.01), la tasa de apoptosis de las células también disminuye (P<0.01). En términos de metabolismo del ácido succínico, en comparación con el grupo de control, el suero sanguíneo medicamentoso XYXT al 10% reduce el nivel de ácido succínico de las células HepG2, MHCC97H (P<0.05, P<0.01), aumenta la actividad de la SDH (P<0.01), y regula significativamente el nivel de succinilación. En términos de regulación de la vía YAP1/SIRT5, en comparación con el grupo de control, el suero sanguíneo medicamentoso XYXT al 10% reduce significativamente la expresión de YAP1 del ARNm y la proteína en las células HepG2, MHCC97H (P<0.05, P<0.01), y aumenta significativamente la expresión del ARN mensajero y la proteína de SIRT5 (P<0.05, P<0.01). Los resultados del acoplamiento molecular muestran que YAP1 y SIRT5, así como los principales componentes activos de XYXT, tienen una buena capacidad de unión con las proteínas diana YAP1 y SIRT5. Conclusión: XYXT regula el metabolismo del succinato, la modificación de la succinilación y la inhibición de las células cancerosas del hígado interviniendo en la vía de señalización YAP1/SIRT5.

Cáncer de hígado;XYXT;Succinato;Succinilación;Proteína 1 asociada al síndrome de Yes (YAP1);Factor regulador de la información silenciosa 5 (SIRT5)