El objetivo del estudio fue investigar el efecto de la fórmula Jiawei Buyang Huanwu Tang a través de la vía de señalización mediada por la proteína quinasa 1 hipotética inducida por PTEN/E3 ubiquitina ligasa (PINK1/Parkin) sobre la mitofagia en ratones con isquemia cerebral y reperfusión, y explorar el mecanismo por el cual Jiawei Buyang Huanwu Tang mejora la isquemia cerebral y reperfusión. Se dividieron aleatoriamente 72 ratones machos C57BL/6J en 6 grupos de 12 cada uno, incluidos un grupo sham (falsamente operado), un grupo modelo de oclusión y reperfusión de la arteria cerebral media (MCAO/R), tres grupos con dosis bajas, medias y altas de Jiawei Buyang Huanwu Tang (8.84, 17.68, 35.36 g·kg⁻¹·d⁻¹) y un grupo de aspirina (13.00 mg·kg⁻¹·d⁻¹). Se evaluó la puntuación del déficit neurológico mediante el método Zea-Longa; la proporción del volumen del infarto cerebral se midió mediante tinción con 2,3,5-trifeniltetrazolio (TTC); la patología del tejido cerebral y el daño neuronal mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE) y tinción de Nissl; la apoptosis celular mediante el método TUNEL; la ultraestructura mitocondrial en tejido cerebral observada por microscopía electrónica de transmisión (TEM); los niveles de superóxido dismutasa (SOD) y malondialdehído (MDA) en suero determinados por ELISA; la expresión de ARNm y proteína de PINK1, Parkin, LC3B, LC3II/LC3I y p62 detectada por PCR cuantitativa en tiempo real y western blot, respectivamente. En comparación con el grupo sham, los ratones modelo mostraron una puntuación de déficit neurológico y proporción de volumen del infarto cerebral significativamente aumentadas (P<0.01), lesiones graves en la corteza cerebral del infarto, con densidad neuronal reducida, vacuolización del soma, picnosis nuclear, una disminución significativa en el número de corpúsculos de Nissl, la disolución y falta de definición de los corpúsculos de Nissl en el citoplasma de algunas células piramidales, un aumento significativo en el número de células TUNEL positivas (P<0.01), ruptura de crestas mitocondriales y vacuolización de la matriz, ruptura de la membrana externa mitocondrial, formación y aumento significativo en el número de autofagosomas, actividad sérica de SOD significativamente disminuida (P<0.01), contenido de MDA significativamente aumentado (P<0.01), expresión relativa aumentada de ARNm y proteína de PINK1, Parkin y LC3B (P<0.05, P<0.01), y expresión significativamente reducida de p62 (P<0.05, P<0.01). En comparación con el grupo modelo, los grupos tratados mostraron una disminución significativa en la puntuación del déficit neurológico y la proporción del volumen del infarto cerebral (P<0.01), un aumento significativo en la densidad neuronal, reducción de la vacuolización, normalización progresiva de la morfología nuclear, aclaramiento progresivo del núcleo, aumento significativo en la densidad de distribución de los corpúsculos de Nissl, reducción de la disolución y mejora en la definición de los mismos, reconstrucción parcial de la membrana de las crestas mitocondriales, presencia parcial de autofagosomas, reducción del grado de daño mitocondrial, actividad sérica de SOD significativamente aumentada (P<0.01), contenido de MDA significativamente disminuido; expresión significativamente aumentada de ARNm y proteína de PINK1, Parkin y LC3II/LC3I (P<0.05, P<0.01); expresión significativamente reducida de ARNm y proteína p62 en los grupos de dosis baja y media (P<0.05, P<0.01), con significancia estadística. Conclusión: Jiawei Buyang Huanwu Tang puede aumentar los niveles de expresión proteica de PINK1, Parkin y LC3II/LC3I y disminuir la expresión de la proteína p62, lo que sugiere que podría mejorar el daño por isquemia cerebral y reperfusión a través de la regulación de la expresión proteica relacionada con la vía de señalización PINK1/Parkin, y la regulación de la mitofagia podría ser una de las rutas por las que Jiawei Buyang Huanwu Tang alivia el daño por isquemia cerebral y reperfusión en ratones.

Jiawei Buyang Huanwu Tang; preparación compuesta Guqi Tongmai; isquemia cerebral y reperfusión; autofagia; vía de señalización de la quinasa 1 inducida por PTEN/E3 ubiquitina ligasa (PINK1/Parkin)