Ganlu Xudoudan治疗病毒性肺炎的潜在成分及作用机制

ZHANG Weichao ,  

LI Yayun ,  

GAO Tianci ,  

HOU Mengxing ,  

XU Wenzhong ,  

CHEN Fenqiao ,  

摘要

El objetivo es utilizar la farmacología de redes y la tecnología de acoplamiento molecular combinada con validación experimental in vivo para explorar el mecanismo de acción de Ganlu Xudoudan en el tratamiento de la neumonía viral. Los métodos predicen los componentes principales, genes diana y vías principales de Ganlu Xudoudan mediante la farmacología de redes y el acoplamiento molecular, y luego usan el acoplamiento molecular para validar los componentes principales con los puntos clave. Se seleccionan aleatoriamente sesenta ratones machos C57BL/6, se distribuyen en grupos blanco, modelo, dexametasona, baja, media y alta de Ganlu Xudoudan (10 por grupo). El grupo de control y el grupo modelo reciben un lavado gástrico de 1 vez al día de solución salina fisiológica (10 mL·kg-1), el grupo de dexametasona recibe una inyección intraperitoneal de 5 mg·kg-1 de dexametasona, los grupos baja, media y alta de Ganlu Xudoudan se administran por vía oral con una solución de 1,3, 2,6 y 3,9 g·kg-1 de concentración, cada 12 horas. Midiendo la relación de masa húmeda/sec de tejido pulmonar (W/D), mediante la tinción de hematoxilina y eosina (HE), observando las modificaciones histológicas del tejido pulmonar del ratón, mediante el método de ensayo de enzimoinmunoabsorción ligado (ELISA) para detectar los niveles de expresión de citoquinas inflamatorias como el factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), la interleucina (IL)-17 y el IL-1β en el lavado broncoalveolar (BALF), mediante un método de inmunotransferencia de proteínas (Western blot) para detectar la expresión de proteínas de la fosfatidilinositol 3-cinasa (PI3K) y la proteína kinasa (Akt) en el tejido pulmonar para validar los resultados. Los resultados de este estudio identifican 12 componentes activos potenciales en Ganlu Xudoudan mediante la farmacología de redes, 306 puntos comunes entre Ganlu Xudoudan y la neumonía viral, se obtienen 20 puntos clave mediante análisis de la red de interacción proteína-proteína (PPI), y las 20 principales vías de señalización se obtienen mediante análisis de enriquecimiento genético de la ontología de genes (GO) y del libro de recetas Enciclopedia de Genes y Genomas de Kyoto (KEGG), construyendo una red componentes activos-puntos comunes-vías de señalización. La validación del acoplamiento molecular muestra que los componentes principales de Ganlu Xudoudan tienen una fuerte afinidad con los receptores diana clave de la neumonía viral. Los resultados de los experimentos animales muestran que en comparación con el grupo de control, la estructura del epitelio bronquial y las estructuras alveolares de los tejidos pulmonares de los ratones del grupo modelo están gravemente dañadas, hay una infiltración masiva de células inflamatorias, se incrementan los alvéolos y hay un edema intersticial significativo. W/D, los niveles de citoquinas inflamatorias IL-1β, TNF-α, IL-17 en BALT aumentan significativamente, y los niveles de expresión de proteínas p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt en el tejido pulmonar aumentan significativamente (P<0,05). En comparación con el grupo modelo, las lesiones pulmonares en los ratones de los diversos grupos de dosis de Ganlu Xudoudan y el grupo de dexametasona se atenúan, W/D, los niveles de TNF-α disminuyen significativamente (P<0,05) en los grupos de dosis bajos y altos de Ganlu Xudoudan; los niveles de IL-1β y IL-17 disminuyen significativamente en los grupos de dosis media y alta de Ganlu Xudoudan y en el grupo de dexametasona, los niveles de expresión de proteínas p-PI3K/PI3K, p-Akt/Akt en el tejido pulmonar disminuyen significativamente (P<0,05). Conclusión Ganlu Xudoudan puede mejorar las lesiones pulmonares en ratones con neumonía viral mediante la inhibición de la reacción inflamatoria, y el mecanismo de acción puede estar relacionado con la inhibición de la activación de la vía PI3K/Akt.

关键词

网络药理学;分子对接;Ganlu Xudoudan;病毒性肺炎;磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路

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