Objetivo: La angélica (当归), como materia prima medicinal y alimentaria comúnmente utilizada en grandes cantidades, presenta frecuentemente fenómenos de adulteración en el mercado, afectando gravemente la eficacia clínica de los preparados. Actualmente, las técnicas de identificación cualitativa de adulterantes están bastante maduras, pero los métodos cuantitativos para detectar adulteraciones en productos procesados aún no existen. Este estudio lleva a cabo una investigación cuantitativa utilizando la angélica y su principal adulterante cercano “angélica terrestre” (朝鲜当归) como ejemplo, con el objetivo de establecer un método molecular de detección cuantitativa de hierbas y sus productos procesados (Herb-Q), proporcionando un modelo para establecer técnicas de detección cuantitativa para la materia prima de angélica y sus productos relacionados de salud. El método se basa en la selección de sitios específicos de polimorfismos de nucleótido simple (SNP) de la angélica y de la angélica coreana basados en la secuenciación completa del genoma del cloroplasto. Se seleccionaron sitios específicos de angélica para estudiar la metodología cuantitativa usando mezclas de polvo de hierbas con diferentes proporciones de adulteración (linealidad, límite cuantitativo, límite de detección y reproducibilidad). Se utilizaron tres proporciones diferentes de adulteración (15 %, 25 %, 35 %) en un polvo activo para la activación de la circulación sanguínea y alivio del dolor para validar la precisión del método Herb-Q en la detección cuantitativa de medicamentos chinos que contienen angélica. Resultados: Comparando 123 secuencias del genoma del cloroplasto del género angélica, y basándose en la conservación intra-específica, especificidad inter-específica y requisitos de secuenciación por pirofosfato de alto rendimiento, se determinaron los sitios 9674 (A/G) en la secuencia del genoma del cloroplasto NC_042826.1 y 38592 (T/C) en la secuencia NC_029393.1 como sitios moleculares específicos de la angélica y la angélica coreana, respectivamente. Se seleccionó el sitio específico de angélica en la posición 9674 (A/G) para establecer la relación lineal del método Herb-Q, con un valor R² de 0,9974 (R² > 0,99), lo que indica una buena linealidad. Los límites cuantitativo y de detección fueron del 2,0 %, y la reproducibilidad fue buena [desviación estándar relativa (RSD) < 2,0 %]. Basándose en el sistema cuantitativo construido con el método Herb-Q, se detectó la cantidad de adulterante angélica coreana en el polvo activo para la activación de la circulación sanguínea, con una desviación promedio de repetición molecular del 1,3 %. Conclusión: Este estudio demuestra que el método de detección cuantitativa Herb-Q basado en el sitio 9674 (A/G) del genoma del cloroplasto NC_042826.1 de la angélica tiene buena aplicabilidad, objetividad y precisión para la angélica y la “angélica terrestre” y sus productos procesados, pudiendo proporcionar soporte técnico para la detección cuantitativa de productos derivados de angélica comercializados, tales como preparados medicinales chinos, suplementos dietéticos y productos de salud.
关键词
método de detección molecular cuantitativa de hierbas (Herb-Q); angélica; adulteración; secuenciación por pirofosfato; estudio cuantitativo