Objetivo: El promotor U6 es un elemento clave en el sistema de edición genética CRISPR/Cas9 en plantas dicotiledóneas, que conduce la expresión del ARN guía (sgRNA), compuesto por secuencias palindrómicas cortas en clústeres regulares. Los promotores U6 endógenos generalmente tienen una actividad de transcripción más alta, lo que mejora significativamente la eficiencia de la edición genética. Este estudio tiene como objetivo identificar los promotores U6 endógenos en artemisa para optimizar su sistema de edición genética CRISPR/Cas9, lo cual es importante para la mejora molecular de artemisa. Método: Basado en la secuencia altamente conservada del snRNA U6 nuclear de Arabidopsis, se seleccionaron secuencias promotoras U6 endógenas del genoma completo de artemisa, luego se construyeron vectores recombinantes con el gen de luciferasa (LUC) impulsados por los promotores U6 candidatos, se realizó una transformación transitoria en tabaco de Virginia y se evaluó la actividad transcripcional de cada promotor mediante imágenes in vivo y sistema reportero de luciferasa doble. Resultados: Se clonaron con éxito 8 promotores U6 endógenos de artemisa. El análisis de secuencias mostró que estos promotores contienen elementos cis conservados que afectan su actividad transcripcional, como USE y TATA-box. La prueba de actividad de luciferasa doble indicó que la actividad transcripcional de AaU6-3, AaU6-1 y AaU6-5 fue significativamente mayor que la de AtU6-26 en Arabidopsis, siendo AaU6-3 la más activa. Conclusión: Este estudio identificó 3 promotores U6 endógenos con alta actividad transcripcional en artemisa, proporcionando elementos funcionales importantes para construir un sistema de edición genética eficiente en artemisa, lo que ayudará a impulsar la mejora molecular precisa y la innovación de recursos genéticos de alta calidad de artemisa.

Artemisa; promotor U6; actividad transcripcional