El objetivo es construir una red reguladora competitiva de ARN endógeno (ceRNA) relacionada con el microARN-342-3p (miR-342-3p) y explorar el mecanismo molecular mediante el cual la tableta Danlou (DLT) mejora el depósito de lípidos hepáticos a través del ARN circular rico en cisteína transmembrana regulador BMP1 (circCRIM1) / miR-342-3p / factor de transcripción SRY-box 6 (SOX6) mediando la síntesis de ácidos grasos. Se utilizaron bases de datos para construir la red reguladora ceRNA relacionada con miR-342-3p y se validaron las relaciones objetivo circCRIM1/miR-342-3p y miR-342-3p/SOX6 mediante ensayo reportero de doble luciferasa. En los experimentos in vivo, los ratones C57BL/6 se usaron como grupo control alimentados con dieta normal, mientras que los ratones con deleción del gen apolipoproteína E (ApoE^-/-) se dividieron aleatoriamente en grupo modelo, grupos con dosis bajas, medias y altas de DLT (DLT-L, DLT-M, DLT-H, 340, 680, 1360 mg·kg^-1·día^-1) y grupo con simvastatina (2,275 mg·kg^-1·día^-1). El modelo se estableció con una dieta alta en grasas durante 12 semanas, seguido de la administración oral durante 4 semanas consecutivas. Se utilizó un analizador bioquímico automático para medir los niveles de lípidos séricos y función hepática, y kits para detectar los niveles lipídicos hepáticos. Los cambios patológicos tisulares hepáticos se observaron mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE) y Oil Red O. La expresión de circCRIM1 y miR-342-3p en el hígado se detectó mediante PCR en tiempo real, al igual que la expresión de SOX6, PPARγ, LXRα y SREBP1c a nivel de ARNm y proteína con PCR en tiempo real y el sistema automatizado de Western blot Wes. La inmunohistoquímica se utilizó para detectar la expresión de SOX6 en los tejidos hepáticos. En experimentos in vitro, se indujo un modelo de depósito lipídico en células HepG2 usando ácido oleico (OA). Las células se dividieron en grupo control (CON), grupo OA (400 μmol·L^-1 OA), grupo suero blanco (BS) (400 μmol·L^-1 OA + 10% suero blanco) y grupo DLT (400 μmol·L^-1 OA + 10% suero medicado con DLT). Se utilizaron kits bioquímicos para medir los niveles lipídicos en células HepG2 y tinción con Oil Red O para observar cambios morfológicos; se realizaron sobreexpresión de circCRIM1 (OE-cricCRIM1), inhibición de miR-342-3p (inhibidor miR-342-3p) e intervención con suero medicado con DLT; se detectó la expresión de circCRIM1, miR-342-3p y mRNA correspondiente por PCR en tiempo real. In vivo, comparado con el grupo control, el grupo modelo mostró anomalías significativas en lípidos séricos, función hepática y niveles lipídicos hepáticos (P<0,01), cambios estructurales hepáticos, aumento de vacuolización y gotículas lipídicas, elevación significativa de circCRIM1, reducción significativa de miR-342-3p, y aumento significativo de la expresión de SOX6, PPARγ, LXRα y SREBP1c a nivel de ARNm y proteína (P<0,01). Comparado con el grupo modelo, los grupos DLT en diferentes dosis mostraron mejoras significativas en lípidos séricos, función hepática y niveles lipídicos hepáticos (P<0,05, P<0,01), reducción del daño hepático y acumulación de gotículas lipídicas, disminución de la expresión de circCRIM1, aumento significativo de miR-342-3p y disminución significativa de la expresión de SOX6, PPARγ, LXRα y SREBP1c a nivel de ARNm y proteína (P<0,05, P<0,01). In vitro, comparado con CON, el grupo OA mostró un aumento significativo de lípidos en células HepG2 (P<0,01), aumento en cantidad y tamaño de gotículas lipídicas, con mejoría tras la administración de suero medicado con DLT; tras la sobreexpresión de cricCRIM1, aumentaron significativamente los niveles de circCRIM1 y ARNm de SOX6, y disminuyó claramente miR-342-3p (P<0,05, P<0,01); tras la inhibición de miR-342-3p, aumentó significativamente SOX6 ARNm y disminuyó marcadamente miR-342-3p (P<0,01); tras la administración de suero medicado con DLT, aumentó significativamente miR-342-3p, y disminuyeron significativamente los ARNm de SOX6, PPARγ, LXRα y SREBP1c (P<0,01). Conclusión: DLT puede mejorar el depósito lipídico hepático regulando la síntesis de ácidos grasos a través de la vía circCRIM1/miR-342-3p/SOX6, contribuyendo a la prevención y tratamiento de la aterosclerosis.

Tableta Danlou; aterosclerosis; ARN circular transmembrana rico en cisteína regulador BMP1 (circCRIM1) / microARN-342-3p (miR-342-3p) / factor de transcripción SRY-box 6 (SOX6); síntesis de ácidos grasos; depósito lipídico hepático