Mecanismo mediante el cual Zuo Gui Wan regula la vía señalizadora cGAS/STING para mejorar el microambiente inflamatorio ovárico y tratar el envejecimiento ovárico con células madre reproductivas ováricas

ZHENG Yunling ,  

PAN Xinyi ,  

LI Zuang ,  

WANG Yixuan ,  

AN Junyi ,  

ZOU Yuxin ,  

XIAO Mengting ,  

CHEN Zheng ,  

ZHU Ling ,  

摘要

El objetivo fue investigar el mecanismo por el cual Zuo Gui Wan mejora el microambiente inflamatorio ovárico y la capacidad de las células madre reproductivas ováricas (OSCs) para tratar el envejecimiento ovárico, basado en la vía de señalización cGAS/STING (ciclic GMP/adenilato sintetasa/interferón estimulador de gen). Método: 40 ratonas C57BL/6 se dividieron aleatoriamente en grupo control, grupo modelo, grupos con dosis baja (2,7 g·kg-1) y alta (5,4 g·kg-1) de Zuo Gui Wan, y grupo de valerato de estradiol (0,15 mg·kg-1), 8 por grupo. Excepto el grupo control, los demás recibieron una inyección intraperitoneal única de ciclofosfamida de 120 mg·kg-1 para establecer el modelo de envejecimiento ovárico. Tras el éxito del modelo, se administró tratamiento continuo a cada grupo durante 4 semanas, una vez al día. Se observó el estado fisiológico de las ratonas, se calculó el índice ovárico; se monitoreó el ciclo estral; se observaron cambios patológicos en tejido ovárico mediante tinción con hematoxilina-eosina (HE); niveles hormonales séricos se detectaron por ELISA; factores inflamatorios séricos IL-1β, TNF-α, IL-6 se midieron mediante kits; expresión proteica de cGAS, STING, p-STING, TBK1, p-TBK1, Fragilis, MVH se detectó por Western blot; expresión de ARNm inflamatorio en tejido ovárico se midió por PCR cuantitativa en tiempo real; se localizó OSCs mediante inmunofluorescencia doble y se calcularon intensidades fluorescentes de marcadores de células madre MVH y Oct4. Resultados: comparado con el control, el grupo modelo mostró disminución significativa en peso corporal, peso húmedo ovárico e índice ovárico (P<0.01), desorden significativo del ciclo estral (P<0.01), incremento significativo en niveles séricos de FSH, TNF-α, IL-6, IL-1β (P<0.01), reducción significativa de AMH y E2 (P<0.01). La expresión proteica de cGAS, p-STING/STING y p-TBK1/TBK1 aumentó claramente (P<0.05, P<0.01), expresiones de proteínas OSCs MVH y Fragilis disminuyeron significativamente (P<0.01), intensidades fluorescentes de MVH y Oct4 bajaron notablemente (P<0.01), y expresión de ARNm inflamatorio TNF-α, IL-6, IL-1β aumentó (P<0.05, P<0.01). Comparado con el grupo modelo, los grupos tratados mostraron mejora significativa en peso corporal, peso húmedo ovárico e índice ovárico (P<0.05), reducción en desorden del ciclo estral (P<0.05, P<0.01), disminución en niveles séricos de FSH, TNF-α, IL-6, IL-1β (P<0.05, P<0.01), aumento en niveles de AMH y E2 (P<0.01), reducción en expresión proteica cGAS, p-STING/STING y p-TBK1/TBK1 (P<0.05), aumento en proteínas MVH y Fragilis (P<0.05), incremento en intensidades fluorescentes MVH y Oct4 (P<0.05, P<0.01), y disminución en expresión de ARNm inflamatorio ovárico (P<0.05). Conclusión: Zuo Gui Wan podría regular la vía señalizadora cGAS/STING, aliviar la respuesta inflamatoria ovárica, regular la homeostasis del microambiente ovárico y mantener la capacidad de las OSCs para mejorar la función ovárica y retrasar el envejecimiento ovárico.

关键词

envejecimiento ovárico; Zuo Gui Wan; células madre reproductivas ováricas (OSCs); vía cGAS-sintasa de GMP cíclico-activador de genes interferón (STING); respuesta inflamatoria

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