Mecanismo de acción de la decocción Banxia Baizhu Tianma para regular el inflamasoma NLRP3 y mejorar el deterioro cognitivo en la epilepsia

ZHU Xingdan ,  

KAI Yinhua ,  

TIAN Rong ,  

YANG Xin ,  

HE Jiayi ,  

GUO Xiangxin ,  

MU Yadong ,  

JIANG Cui ,  

摘要

El objetivo es investigar el mecanismo por el cual la decocción Banxia Baizhu Tianma (BBTT) mejora el deterioro cognitivo en ratas modelo de epilepsia inducida por cloruro de litio-pilocarpina a través de la regulación del inflamasoma NOD-like receptor proteína 3 (NLRP3) mediador de la respuesta neuroinflamatoria. Métodos: 60 ratas macho SD fueron asignadas aleatoriamente en grupos: control, modelo, carbamazepina (CBZ) (0.125 g·kg-1·d-1), BBTT (1.04 g·kg-1·d-1) y grupo combinado (CBZ 0.125 g·kg-1·d-1 + BBTT 1.04 g·kg-1·d-1), con 12 ratas por grupo. Después de inducir el modelo de epilepsia, se realizó intervención oral continua durante 12 semanas. Se evaluaron el comportamiento hiperexcitable y la función cognitiva en las semanas 6 y 12 mediante la prueba del lápiz y el laberinto de Barnes. Tras 12 semanas de intervención, se registraron la frecuencia y gravedad de las convulsiones según la escala de comportamiento Racine. Posteriormente se sacrificaron los animales bajo anestesia para recolectar muestras de suero y tejido hipocampal y realizar los siguientes análisis: tinción de Nissl para evaluar el daño neuronal en la región CA1 del hipocampo; medición de malondialdehído (MDA) en el tejido hipocampal mediante el método de ácido tiobarbitúrico (TBA); cuantificación de factores inflamatorios TNF-α, IL-1β e IL-18 en suero por ELISA; detección de expresión del proteína ASC asociado a puntos apoptóticos en el hipocampo por inmunohistoquímica; análisis cuantitativo de expresión de proteínas NLRP3, caspasa-1 (Caspase-1) y factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) en tejido hipocampal mediante Western blot. Resultados: a las 6 y 12 semanas después de la modelación, las puntuaciones en la prueba del lápiz aumentaron significativamente en el grupo modelo, mientras que la puntuación estratégica en el laberinto de Barnes disminuyó y el período de latencia se alargó significativamente (P<0.05); los niveles de factores inflamatorios en suero aumentaron notablemente (P<0.05); el número de neuronas en el hipocampo disminuyó, con disposición desordenada y aumento de los espacios; el contenido de MDA en el hipocampo aumentó significativamente (P<0.05), la expresión positiva de ASC se incrementó, así como la expresión de proteínas Caspase-1, NLRP3 y BDNF (P<0.05). En comparación con el grupo modelo, tras 12 semanas de intervención con BBTT en ratas epilépticas, las puntuaciones en la prueba del lápiz disminuyeron considerablemente, la puntuación y la frecuencia de las convulsiones disminuyeron, la duración de las convulsiones se acortó, mientras que la puntuación estratégica en el laberinto de Barnes aumentó significativamente y el período de latencia de escape se redujo (P<0.01); los niveles de factores inflamatorios en suero disminuyeron notablemente (P<0.05); la morfología neuronal del hipocampo fue más regular; el contenido de MDA en el hipocampo disminuyó (P<0.05), la expresión positiva de ASC disminuyó, y las expresiones de proteínas Caspase-1, NLRP3 y BDNF bajaron significativamente (P<0.05, P<0.01). Además, en comparación con el grupo CBZ, el tratamiento combinado de BBTT y CBZ controló mejor las convulsiones, mejoró las puntuaciones del comportamiento cognitivo, mantuvo morfología neuronal hipocampal más intacta, redujo productos de estrés oxidativo, disminuyó niveles de factores inflamatorios, redujo la expresión positiva de ASC y disminuyó las proteínas Caspase-1, NLRP3 y BDNF, aunque las diferencias no fueron estadísticamente significativas. Conclusión: BBTT puede mejorar el deterioro cognitivo asociado con la epilepsia inhibiendo la expresión del inflamasoma NLRP3, atenuando la neuroinflamación y controlando las convulsiones.

关键词

Epilepsia; deterioro cognitivo; inflamasoma NOD-like receptor proteína 3 (NLRP3); neuroinflamación; decocción Banxia Baizhu Tianma (BBTT); calmar el viento y transformar la flema

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