El propósito es investigar el efecto inmunomodulador de los polisacáridos Qigui en las células macrofágicas RAW264.7 inducidas por lipopolisacárido (LPS), y caracterizar la fracción activa de polisacáridos uniformes Qigui AAPS-4a y evaluar su efecto protector en la colitis ulcerosa (UC). Se utilizó el método de ensayo de proliferación y actividad celular (CCK-8) para detectar el efecto de 6 tipos de polisacáridos Qigui (0.01~100 mg·L^-1) en la proliferación de células RAW264.7. Se utilizó el método de ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) para investigar el efecto de 6 tipos de polisacáridos Qigui (3, 10 mg·L^-1) en los niveles de factor de necrosis tumoral-α (TNF-α), interferón-β (IFN-β) y óxido nítrico (NO) inducidos por LPS en células RAW264.7. Después de la selección de polisacáridos activos, se utilizó cromatografía de exclusión de tamaño de alta eficacia (HPSEC) para medir su uniformidad y peso molecular relativo, se utilizó espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier (FT-IR) para identificar grupos funcionales característicos, se utilizó cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) para analizar la composición de monosacáridos, se utilizó cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS) para analizar el tipo y modo de unión de residuos de azúcar, y se utilizaron las técnicas de resonancia magnética nuclear unidimensional y bidimensional (NMR) para determinar la composición y configuración de los residuos de azúcar. En el experimento con animales, se dividió en grupo normal, grupo modelo, grupo de dosis bajas de AAPS-4a (50 mg·kg^-1), grupo de dosis altas de AAPS-4a (100 mg·kg^-1) y grupo de sulfasalazina (SASP) (75 mg·kg^-1), excepto el grupo normal que se utilizó el sulfato de dextrano sódico al 3.5% (DSS) para inducir un modelo de colitis ulcerosa aguda en ratones. Cada grupo de tratamiento fue administrado por sonda gástrica durante 7 días a la dosis correspondiente, y se registraron cambios en el peso corporal de los ratones. Después del tratamiento, se calcularon el índice esplénico y la puntuación de índice de actividad de la enfermedad (DAI), se utilizó ELISA para detectar los niveles de TNF-α e interleucina-6 (IL-6) en suero, y se observaron cambios patológicos en el tejido intestinal con tinción con hematoxilina y eosina (HE). A nivel celular, AAPS-4a puede inhibir de manera dependiente de la dosis los niveles elevados de TNF-α, IFN-β y NO inducidos por LPS. La caracterización de AAPS-4a muestra que es un polisacárido uniforme con un peso molecular relativo de 7.6×10³ Da, que contiene manosa (Man), glucosa (Glc) y galactosa (Gal), con una relación molar de 1.3∶23.9∶1.0, que se compone principalmente de 1,6-α-D-Glcp, T-α-D-Glcp, 1,3-β-D-Galp, 1,4-α-D-Manp y 1,2-α-D-Galp cinco tipos de residuos de azúcar. Los experimentos in vivo muestran que, en comparación con el grupo normal, las puntuaciones DAI de ratones del grupo modelo y el índice esplénico aumentaron significativamente, la longitud del colon se redujo significativamente, los niveles de factor inflamatorio TNF-α e IL-6 aumentaron significativamente (P<0.01); en comparación con el grupo modelo, el grupo de dosis alta de AAPS-4a puede reducir las puntuaciones DAI, el índice esplénico y los niveles de TNF-α e IL-6, y mejorar la atrofia del colon (P<0.05, P<0.01). La observación patológica muestra que AAPS-4a puede inhibir notablemente la infiltración de células inflamatorias en el tejido del colon y aliviar su daño patológico. En conclusión, AAPS-4a es un polisacárido uniforme neutro compuesto por 1,6-α-D-Glcp, T-α-D-Glcp, 1,3-β-D-Galp, 1,4-α-D-Manp y 1,2-α-D-Galp, que es el componente activo clave del medicamento Qi Gui para ejercer su efecto anti-UC, y tiene un valor potencial de aplicación clínica.

Qi Gui-Dang Gui medicamentos; Polisacáridos; Cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC); Cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS); Resonancia magnética nuclear (NMR); Inmunomodulación; Colitis ulcerosa (UC)