Estudio del efecto de la fórmula Sanjie Quban sobre la proliferación, apoptosis, migración e invasión de fibroblastos de queloide humano basado en la vía de señalización AhR/CYP1A1

HE Zhihong ,  

ZHANG Fengchuan ,  

YANG Dingquan ,  

HUANG Chuhan ,  

WANG Zhihan ,  

WU Yatong ,  

LIU Qingwu ,  

摘要

El objetivo es estudiar el efecto del suero con medicación conteniendo la fórmula Sanjie Quban (SJQB) en la proliferación, apoptosis, migración e invasión de fibroblastos de queloide humano (KFs) mediante la regulación de la vía de señalización del receptor de hidrocarburos aromáticos (AhR) / citocromo P450 familia 1 subfamilia A miembro 1 (CYP1A1) y su mecanismo de acción. Método: se cultivaron KFs humanas primarias in vitro y se dividieron en grupos: grupo control (KFs + suero sin medicación), grupo gispéridina (KFs + suero con gispéridina), grupo fórmula Sanjie Quban (KFs + suero con la fórmula), grupo activador AhR [KFs + β-naftoflavona (β-NF)], grupo inhibidor AhR (KFs + CH223191) y grupo inhibidor AhR + fórmula Sanjie Quban (KFs + CH223191 + suero con la fórmula). La concentración óptima de intervención se seleccionó mediante el método CCK-8 para evaluar la proliferación y viabilidad celular; la proliferación celular se detectó mediante el método EdU; la apoptosis se detectó mediante citometría de flujo; la migración y capacidad de invasión celular se evaluaron mediante el ensayo de raspado y el experimento Transwell; la expresión de proteínas TGF-β1 y α-SMA se determinó mediante inmunofluorescencia; la expresión de ARNm de AhR, CYP1A1, TGF-β1 y α-SMA se detectó mediante PCR cuantitativa en tiempo real; el nivel de proteínas AhR, CYP1A1, TGF-β1 y α-SMA se detectó mediante Western blot. Resultados: en comparación con el grupo control, los grupos fórmula Sanjie Quban, gispéridina y activador AhR mostraron una disminución significativa en la tasa de proliferación celular, migración e invasión (P < 0.01) y un aumento significativo en la tasa de apoptosis (P < 0.01); en comparación con el grupo activador AhR, el grupo inhibidor AhR mostró un aumento en la proliferación celular, migración e invasión, y una disminución significativa en la apoptosis (P < 0.01); en comparación con el grupo fórmula Sanjie Quban, el grupo inhibidor AhR + fórmula Sanjie Quban mostró un aumento en la proliferación, migración e invasión celular y una disminución significativa en la apoptosis (P < 0.05, P < 0.01). Los resultados moleculares mostraron que, en comparación con el grupo control, los grupos fórmula Sanjie Quban, gispéridina y activador AhR tenían una expresión significativamente aumentada de proteínas y ARNm de AhR y CYP1A1 (P < 0.05, P < 0.01); los grupos fórmula Sanjie Quban y activador AhR mostraron una expresión significativamente reducida de proteínas y ARNm de TGF-β1 y α-SMA (P < 0.05, P < 0.01); el grupo gispéridina mostró una disminución significativa en la expresión de proteína TGF-β1 y ARNm α-SMA (P < 0.05, P < 0.01); en comparación con los grupos activador AhR y control, el grupo inhibidor AhR mostró una expresión significativamente reducida de proteínas y ARNm de AhR y CYP1A1 (P < 0.01) y un aumento significativo en la expresión de proteínas y ARNm de TGF-β1 y α-SMA (P < 0.01); en comparación con el grupo fórmula Sanjie Quban, el grupo inhibidor AhR + fórmula Sanjie Quban mostró una expresión significativamente reducida de proteínas y ARNm de AhR y CYP1A1 (P < 0.01) y un aumento significativo en la expresión de proteínas y ARNm de TGF-β1 y α-SMA (P < 0.05, P < 0.01). Conclusión: la fórmula Sanjie Quban puede inhibir la proliferación, migración e invasión de células KFs y promover su apoptosis, y este mecanismo puede estar relacionado con la activación de la vía de señalización AhR/CYP1A1, reduciendo así la expresión de TGF-β1 y α-SMA.

关键词

fórmula Sanjie Quban; receptor de hidrocarburos aromáticos (AhR) / citocromo P450 familia 1 subfamilia A miembro 1 (CYP1A1) vía de señalización; queloide; fibroblasto

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